BD流式校准微球 仪器质控微球655050

 

产品介绍
BD FACSDiva CS&T研究微球（CS&T研究微球）设计用于运行BD FACSDiva™™软件（v7.0或更高版本）的BD™流式细胞仪。磁珠使软件能够自动表征、跟踪和报告支持的BD数字流式细胞仪的测量结果。CS&T研究微球用荧光染料染色，荧光染料由流式细胞仪的激光激发。
 
主要用途​​
1.仪器性能监控：确保激光稳定性、PMT（光电倍增管）灵敏度及荧光检测准确性。

2.标准化校准：
●激光延迟时间校准
●荧光补偿矩阵验证
●前向散射（FSC）和侧向散射（SSC）标准化
●多色荧光通道的灵敏度优化

3.实验质量控制：用于实验前、实验后的仪器状态确认，确保数据可重复性。
 
产品特性​​
 ​​ ●粒径：6μm（模拟细胞大小，适用于常规流式检测）。
  ●荧光标记：含多种荧光染料（如 FITC、PE、PerCP-Cy5.5 等），覆盖常见检测通道。
  ●稳定性：4℃避光保存，有效期12个月；开封后建议1个月内使用完毕。
  ​​●包装规格：5 mL/瓶，可直接上机使用。
 
操作流程
 一、实验前准备​​
1.仪器准备​​
    ●开启流式细胞仪电源，启动BD FACSDiva™ 7软件
    ●激光预热≥15分钟（488nm/640nm等激光器需达到稳定状态）
    ●检查鞘液（≥500mL）和废液桶（空置状态）
 
2.微球准备​​
    ●从4℃冰箱取出微球（货号655050）室温平衡15分钟
 ​   ●关键步骤：涡旋振荡器混匀30秒（转速≥2000rpm）
    ●肉眼观察确认无沉淀（如发现颗粒聚集需延长混匀时间）
 
二、上机操作流程​​
1.软件设置​​
●选择菜单：Cytometer→CS&T (Cytometer Setup and Tracking)​​
●根据需求选择模式：
 

模式	检测内容	耗时
Quick QC	基础激光/PMT状态	3-5分钟
Full CS&T	全参数校准（含补偿矩阵）	15-20分钟

2.样本加载​​
●取50-100μL混匀微球加入专用上样管（推荐BD Falcon™ 5mL圆底管）
●上机前用70%乙醇擦拭管口避免污染

3.数据采集​​
●点击"Acquire"开始采集，目标收集≥10,000个微球事件​​
●流速设置：Low（12μL/min）以确保数据稳定性
●实时监控FSC/SSC散点图，确认微球群集中在预期位置
 
三、质控标准验证​​
1.核心参数判读
 

参数	合格标准	异常处理
FSC-H	6μm微球群CV≤3%	检查液流稳定性
FITC通道	Median值在预设范围	调整PMT电压
激光功率	波动＜±2%	联系工程师维护

2.报告生成​​
●软件自动生成PDF报告（含历史数据对比曲线）
●命名规则：日期_仪器编号_操作者（例：20240721_FACSAriaII_Zhang）

四、故障排除
 

问题	可能原因	解决方案
微球信号不稳定	微球未混匀或沉淀	重新涡旋振荡，检查悬液均匀性
CV值过高	PMT电压异常或激光不稳	重新优化电压，检查激光状态
软件报错“CS&T失败”	微球过期或污染	更换新批次微球，清洁液路
荧光信号偏移	补偿矩阵错误	重新运行补偿微球或手动调整

五、维护与建议​​
1.定期校准：
​​●每日：运行Daily QC（实验前）。
​​●每周：执行Full CS&T（全面校准）。

2.数据记录：保存每次质控报告，建立历史趋势图（便于追踪仪器性能衰减）。

3.微球保存：开封后密封避光，避免反复冻融或高温暴露。
 
储存与注意事项
1.储存在2℃至8℃下，避光保存。不可冷冻。按照指示储存时，珠子在小瓶标签上显示的日期之前是稳定的。过期后请勿使用。稀释后，珠子在避光条件下在2℃至8℃下可稳定24小时，或在15℃至25℃下可稳定8小时。
2.兼容性：专为BD FACSDiva™ 7系统优化，不适用于其他版本软件或非BD机型。
3.废弃物处理：按生物危害废弃物规范处理。