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【供应ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠价格优惠】

基本信息
产品名称:
【供应ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠价格优惠】
英文名称:
ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠
国产/进口:
进口
产地/品牌:
ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠
型号:
ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠
参考报价:
ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠价格请咨询
总点击数:
6558
更新日期:
2020-05-22
产品类别:

性能参数
ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠原理描述

ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠品系描述

     ApoE基因敲除小鼠原理是除LDL以外的所有脂蛋白的结构组成,在维持血脂代谢的平衡中起关键作用。ApoE功能缺失会导致胆固醇清除途径受限,胆固醇残粒在血浆中沉积。ApoE基因敲除严重高胆固醇血症小鼠是首个自发性动脉硬化基因工程小鼠模型,是目前在AS研究领域中应用最多的基因工程动物。ApoE基因敲除小鼠的血浆胆固醇浓度升高5倍,甘油三酯升高68%。血浆LDLVLDL水平显著高于正常对照组,HDL水平则低于正常小鼠。3月龄ApoE基因敲除小鼠可在临近大动脉附近发现脂肪纹,它们对机体造成损害,并且这种损害随年龄增长及脂质减少而增加8月龄时可见严重的冠状动脉堵塞, 17月龄以上ApoE基因敲除小鼠脑部可见晶状胆固醇裂隙脂质滴泡沫细胞中有黄瘤的损害,小的黄瘤在脉络丛和腹侧穹中能看到。病变形态、位置及发展过程均与人类相似,另外在行为上,ApoE基因敲除小鼠对应激反应减弱学习与记忆功能改变,可用于研究apoE缺失在乙酰胆碱神经损害所致认知障碍过程中发挥的作用。

ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠应用领域:

(1) 糖尿病和肥胖研究:非糖尿病型肥胖(饮食诱导的)

(2) 神经生物学研究:阿耳茨海默氏病,行为和听力缺陷,神经变性;

(3) 心血管研究:动脉粥样硬化,血胆固醇过高;

(4) 鼠/人的同源基因:阿耳茨海默氏病,高脂蛋白血症。

ApoE小鼠基因敲除apoe小鼠

    ApoE基因有三个等位基因,即E2E3E4,共构成六种不同的基因型:3种纯合型(E2E2E3E3E4E4)和三种杂合型(E2E3E2E4E3FA)。各种基因分型与心血管疾病、脑中风以及阿尔茨海默症的发生有一定程度的关系,其中又以E3E4E4E4这两种基因分型最具罹患这类疾病的风险。利用CMV启动子系统表达ApoE2ApoE3ApoE4基因的转基因小鼠是研究ApoE基因与冠心病、高脂血症、脑栓塞等疾病相关性和发病机制的重要模型。

 

     基因敲出小鼠是利用基因打靶技术产生转基因动物的程序,基因敲出小鼠程序一般为:(1)构建基因打靶载体; (2)将基因打靶载体通过一定的方式(常用电穿孔法)导入同源的胚胎干细胞中,使外源DNA与胚胎干细胞基因组中相应部分发生同源重组,将打靶载体中的DNA序列整合到内源基因组中从而得以表达; (3)筛选发生同源重组的阳性克隆,基因敲出小鼠构建通过显微注射或者胚胎凝集的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内制作嵌合体小鼠,在生物活体中研究特定基因的功能。基因敲除小鼠使得研究者们能够观察到某一特定基因完全失活后小鼠表型的改变,从而推断出特定基因的作用。基因敲出小鼠基因打靶的原则是, 外源DNA 片段含有与目的基因的某一段核酸序列相同或接近的同源序列, 同源重组就发生在这两个序列之间。外源DNA 序列的定位整合有两种方式, 即插入型(又称O 型) 和置换型(又称8 型)。与此相对应, 基因敲出小鼠打靶载体可分为两类: 插入型载体和置换型载体。

基因敲除小鼠第一步,胚泡时期发育胚胎的分离。此胚胎来源于灰色品系的小鼠。
基因敲除小鼠第二步,从灰色小鼠胚泡中分离胚胎干细胞,在体外进行培养。

基因敲除小鼠第三步,用同源重组载体转染胚胎干细胞,用含有新霉素和更昔韦洛的培养基筛选发生了同源重组的细胞。
基因敲除小鼠第四步,将筛选得到的胚胎干细胞植入白色小鼠的早期胚胎(胚泡时期)中。

基因敲除小鼠第五步,将上述胚胎植入假孕母鼠(白色)子宫中。

基因敲除小鼠第六步,在母鼠所产的小鼠中,有一些是正常的白色,另一些则是嵌合体灰白相间的小鼠。这些嵌合体小鼠的细胞一部分起源于白色皮毛的胚泡细胞,另一部分则起源于重组的胚胎干细胞。起源于重组胚胎干细胞的皮毛显示出灰色斑块,很好辨认。
基因敲出小鼠第七步,嵌合体小鼠与野生型白色小鼠进行杂交,如果嵌合体小鼠的生殖细胞恰好是起源于重组胚胎干细胞,那么其子代小鼠就都应该呈现灰色。而这些灰色小鼠的所有细胞都是杂合体。
基因敲除小鼠第八步,杂合体灰色小鼠(+/H)之间进行杂交,得到灰色和白色的子代。从灰色子代中筛选出纯合小鼠(H/H),其一对同源染色体上的等位基因都失活,此纯合小鼠即为 “基因敲除小鼠”。
我们有开发的基因敲除小鼠APOE(动脉硬化研究),

PEPT(白内障研究)

Shh+/- 基因敲除小鼠等小鼠: Shh(Sonic hedgehog)基因在脊椎动物胚胎组织形成中起着重要的作用,包括大脑、脊椎、中轴骨骼和四肢的形成。基因敲除小鼠基因缺失的胚胎早期可以观察到中间结构如脊索和地板的形成和维持的影响,晚期可以观察到远肢结构的缺失以及独眼,腹部细胞包括神经管的缺失、脊柱和许多肋骨的缺失。Shh蛋白被证实是脊椎动物发育过程中组织形成所必须的胞外信号。

 

阶段
实验内容
基准周期
备注
siRNA/shRNA序列设计
每条靶基因选取3个靶点位置分别设计siRNA序列
1周
 
siRNA载体构建
将设计好的siRNA序列构建到具有合适筛选标记的质粒载体上
2周
免费提供带neo和GFP标记的载体,也可由您提供指定载体
细胞转染与筛选
采用脂质体转染的方法将构建的siRNA载体转染目标细胞并筛选阳性细胞
2周
 
基因沉默效果鉴定
采用RT-PCR和Western Blot方法检测靶基因的抑制效果
3周
由您指定检测方法和指标以及一抗的提供方式
基因沉默后细胞生理指标变化检测
采用各种方法检测靶基因抑制后细胞生理状况、功能水平等变化
4周
由您指定检测方法和指标
基因沉默稳定细胞株建立
传代培养获取稳定转染的细胞株
12周
 

基因沉默小鼠构建
显微注射法
12周
提供3个以上founder小鼠
 
以上实验项目您可以整体选择或分步选择,为您提供最大的灵活自主性。 选择整体服务以及老客户再次服务或推荐的,将尽力给予让您满意的优惠
公司简介

至善健康医学研究院成立于2005年,专业从事胚胎干细胞、分子生物学及基因工程动物模型敲除的技术研发、技术服务及相关产品和仪器的销售,设有干细胞生物学、分子生物学和基因工程动物表型分析实验室,可提供用于科学研究和药物研发的各类动物胚胎干细胞和人胚胎干细胞、成体细胞、基因工程干细胞株、脐带间充质干细胞、SD大鼠骨髓间充质干细胞、小鼠骨髓间充质干细胞及相关培养基,同时提供基因敲除小鼠订购、转基因小鼠订购、基因沉默小鼠和转基因小鼠等基因工程动物模型的构建和基于干细胞的药物研发服务。另外经营多种细胞生物学、分子生物学相关试剂、耗材和仪器销售。

    随业务范围的扩大,公司面向海内外征集细胞生物学与分子生物学相关产品的合作伙伴。 经营范围:基因敲除小鼠模型建立、销售基因敲除小鼠、销售转基因小鼠、显微注射、基因打靶、条件性敲除、定点敲除转基因载体、基因沉默(siRNA)和质粒DNA表达载体构建实验技术服务;胚胎干细胞培养和细胞生物学实验服务;基因敲除小鼠、基因沉默小鼠和转基因小鼠构建;各种细胞株(人胚胎干细胞、小鼠胚胎干细胞、iPS细胞、成体干细胞和肿瘤细胞);细胞培养基;质粒载体;超纯水、双蒸水、去离子水、医用蒸馏水销售小鼠基因敲除小鼠服务价格,RNA干扰载体构建技术服务,人胚胎干细胞、小鼠胚胎干细胞培养技术服务,基因沉默小鼠构建技术服务,siRNA载体构建技术服务,基因沉默构建技术服务,载体构建技术服务,RNAi表达载体构建服务,转基因小鼠构建,细胞生物学技术服务,分子生物学技术服务, pcDNA载体构建实验服务,siRNA质粒载体构建服务,细胞转染技术服务。                    

      经营范围:出售销售小鼠骨髓间充质干细胞、出售销售大鼠骨髓间充质干细胞,出售销售脐带间充质干细胞,基因敲除载体、转基因载体、基因沉默(siRNA)和质粒DNA表达载体构建实验技术服务;胚胎干细胞培养和细胞生物学实验服务;基因敲除小鼠、基因沉默小鼠和转基因小鼠构建;各种细胞株(人胚胎干细胞、小鼠胚胎干细胞、iPS细胞、成体干细胞和肿瘤细胞);细胞培养基;质粒载体;基因敲除载体、转基因载体、基因沉默载体构建小鼠、siRNA质粒载体构建、RNA载体构建实验技术服务、RNAi载体构建实验技术服务、DNA表达载体构建实验技术服务;胚胎干细胞培养和细胞生物学实验服务;基因敲除小鼠、基因沉默小鼠和转基因小鼠构建;   

      公司秉承“科学至上,锐意进取”的经营理念,坚持“客户第一”的原则为广大客户提供优质的服务。欢迎惠顾!


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