不同质量的内切酶，实验结果大不相同！

2009-04-21 来源:http:// 点击次数:4324

不好的内切酶常常被各种蛋白酶、非特异外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的内切酶切割DNA，则会在切割底物的同时破坏产物的末端（外切酶偷偷切掉1、2个bp，琼脂糖电泳却看不出来），让后续的连接、克隆和表达出现问题！
而NEB提供的内切酶大部分都经过重组改造，在最大程度上避免了外切酶污染的问题，让你的基因安全可靠！

好的内切酶	不好的内切酶
· 活性高 · 品质稳定，保存期长 · 无其它核酸酶污染（包括外切酶污染）	·活性不高 ·保存一段时间后活性迅速下降 ·有其它核酸酶的污染（包括外切酶污染）

质粒DNA

　酶切反应　

好的内切酶切割

　　　不好的内切酶切割

　

完整的DNA片段

连接

　　　完整的DNA片段

　　　　　　　　　　　少量的外切酶损坏DNA末端
　　

　　　　　　　　　　　不完整的DNA片段+1、2个dNTP

连接

成功连接，克隆并表达	连接失败，克隆不成功，无法表达或产物不正确

NEB EcoRV: Survival rate=49/50	Company T EcoRV: Survival rate=3/50

看看，不同质量的内切酶，实验结果大不相同！

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