Gradiflow 技术在蛋白质分离研究中的应用
2011-12-22 来源:本站 点击次数:3240电泳是现代蛋白质研究常用和有效的工具，但是电泳过程中所产生的热量对蛋白质结构的破坏，以及目的蛋白从蛋白胶或其他介质中低的回收效率等等问题，常常让蛋白质更深入的研究戛然而止，而Gradiflow 技术的应用解决了研究者头疼的难题 ！
Gradiflow 技术要点可以简单概括为如下几点：
1. 应用不同孔径大小的聚丙烯酰胺分离膜片；
2. 基于蛋白质或多肽的分子量或(和)等电点来分离；
3. 不同等电点的蛋白质，在不同PH的缓冲液中，带电性质不一样；
4. 不同分子量大小的蛋白质通过不同孔径大小的分离膜。
Gradiflow 技术在蛋白质分离研究中有如下杰出的表现：
1. 抗体的纯化
在大多数抗体的应用过程中，对纯度都有一定的要求，通常研究者喜欢采用纯化方法是沉淀法和亲和层析法，但是抗体的来源却常常会限制研究者的纯化工作。然而Gradiflow 技术却能够解决这样的问题，不论是多抗，还是单抗，不论是羊源抗体，兔源抗体，还是牛源，人源等抗体，都能够被纯化。
多克隆抗体的纯化实例：
Recovery of Ig from Gradiflow and affinity chromatography
2. 蛋白质组预分离
2DE是研究者常用的蛋白质组分析方法，这种方法很有用，但是它的限制因素在实验过程中逐渐呈现出来，比如一些膜蛋白，高分子量和低分子量的蛋白质，就很难用2DE检测出来。特别是一些蛋白样品中包含高丰度的蛋白质，这样就很有可能将研究者感兴趣的蛋白质掩盖，在2DE图谱上体现不出来，从而减少了所检测到的蛋白质的数量。而采用Gradiflow技术对样品进行预分离之后，在进行2DE实验，就能够轻而易举的解决上面的问题。
应用Gradiflow技术，在非变性条件下，血浆中HAS的去除实例：
NuSep 公司08年推出的ProteomeSep MF10 继承了Gradiflow 的技术，并对整个系统加以完善和改进，成为蛋白质预分离的新生代利器！
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