、Tissuelyser系列多样品组织研磨仪研磨植物组织样品典型实验方法

2015-01-09 来源:本站点击次数:2000

Tissuelyser系列多样品组织研磨仪具有高速大振幅的中心轴，通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦，形成空间三维立体的碰撞，保证了研磨珠于样品的充分接触。在几十秒到一分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨，最细可以达到5微米。

对于不同的的样品，Tissuelyser系列多样品组织研磨仪需要用不同的条件来处理，这里面主要涉及研磨频率、研磨时间、研磨温度和研磨珠的选择。以下是Tissuelyser系列多样品组织研磨仪针对一些典型样品的实验方法，仅供参考。

实验一

实验地点：中国水稻所植物分子生物学与基因工程重点实验室

处理材料：水稻叶片（冰箱冻存）

1  将离心管编号，对应编号将相应的水稻叶片整体放到离心管中，重量在100mg左右。
2  分装珠子：在离心管中加入1颗6mm珠子或者2颗5mm珠子。
3  冷冻：将适配器和装好组织和珠子的离心管，放到泡沫箱中，加液氮冷冻，1分钟，充分冷冻适配器及管内样品。
4  转速与时间设定：60赫兹  30秒
5  研磨：在上适配器时，要注意一是要带上厚一点的手套，防止被液氮冻伤；一是要迅速，且要保证螺栓拧紧，卡上保险扣。然后，启动研磨。
6  取下适配器，使整体离心管盖子向上，在桌面上拍一拍，使样品粉末沉落管底，迅速打开离心管盖子，进行下一步实验。

同类适合样品：
由对水稻叶片研磨的良好效果，可以直接类推向对玉米、小麦等作物叶片的处理实验。

实验二

实验地点：南京农业大学园艺学院

处理材料：梨树幼叶、果实等

1 用直径7~8mm打孔器在叶片合适的部位打孔，获取研磨材料圆叶片。

2 将2颗直径为5mm研磨珠和若干（8片）叶圆片放置于2ml离心管（EP管）中。

3 将加完叶圆片和研磨珠的EP管，在适配器上摆好，开盖，加液氮冷冻；2分钟左右，待叶圆片在冷冻的情况下脱去水分，及时将EP管的盖封闭上，继续在液氮中遇冷1分钟。

4 迅速将适配器安置到研磨仪上。

5 在Tissuelyser系列多样品组织研磨仪上60赫兹条件下，研磨30秒，可得到细碎的叶片粉末，用于提核酸或蛋白。