Mouse Neural Stem Cell Nucleofector® Kit——用于小鼠神经干细胞转染
产品介绍
Mouse Neural Stem Cell(mNSC) Nucleofector® Kit 适用于Nucleofector™ IIs/2b转染仪,这是一种单孔细胞核转染仪,支持单孔电转杯的转染平台,适用于难转染细胞系和原代细胞的高效转染。
Mouse Neural Stem Cell Nucleofector® Kit配有专门的操作手册,试剂盒内除含有特异的核转染液(Nucleofector™溶液),另外含有pmaxGFP™对照载体。本试剂盒转染效率高达82%,细胞存活率90%。
Lonza公司有50多种原代细胞转染试剂盒。另外,还有用于4D-Nucleofector™和96-well Shuttle™系统的小鼠神经干细胞(mNSC)电转试剂盒。
试剂盒组分(25 Test)
1. 细胞特异性核转染液(2.25ml)
2. 添加剂(0.5ml)
3. 一次性吸管(与单孔电转杯配套)(25个)
4 .pmaxGFP™ 阳性质粒(30μg)
5. 单孔电转杯(100μl)(25个)
*所有组分可储存在4℃,长期保存时,阳性质粒保存在-20℃。
Nucleofector 细胞核转染技术操作步骤(详细Protocol请登录Lonza官方网站查阅)
整个操作过程只需四步,非常简单、高效。
第1步:处理细胞,精确计数
第2步:混合DNA、转染液,重悬细胞,加入转染杯
第3步:将转染杯放入转染仪,按键选择相应程序,按"start"键开始转染,10秒钟左右
第4步:取出细胞继续培养。
延伸阅读——原位转染
“原位核转染技术”突破了传统电穿孔技术只能在细胞悬液中转染的缺陷,实现了贴壁细胞在培养的不同阶段中直接进行转染的核转染。原位转染技术实现了生理状态下(贴壁培养过程中)的转染,如Basic Neuron Nucleofector® AD 转染试剂盒。
2010年,Lonza推出了4D系统,其中利用X unit的16孔电转板条,推出了第一个原位核转染试剂盒;
2010年,Lonza推出了适用于96孔shuttle系统的新原位转染试剂盒——96孔电转板条。
2011年,Lonza推出了Y unit,可以直接在24孔细胞培养板中进行原位核转染
优势:
– 可在神经元贴壁生长的任何阶段进行原位核转染或多次进行原位核转染
– 原位转染前、中、后,神经元都培养在24孔细胞培养板中,维持贴壁生长的生理状态
– 唯一转染效率最高可达70%的非病毒转染方法
– 整个过程维持了细胞功能
– 适用于共聚焦显微镜下观察和分析