P3 Primary Cell 4D X Kit L——用于原核细胞转染
产品介绍
Lonza公司目前有5种不同的原代细胞转染液(Nucleofector™ Solutions)可适用于4D-Nucleofector系统,分别为P1, P2, P3, P4和P5。
P3 Primary Cell 4D X Kit L适用于4D-Nucleofector细胞核转染系统,该系统采用导电性聚合物,取代了金属铝离子,保证高效转染的同时获得高的细胞存活率。由于哺乳动物神经细胞缺乏细胞特异的Amaxa™优化操作手册,可使用P3 Primary Cell Kits配有细胞特异的Protocol,可用来优化哺乳动物神经细胞的转染条件。可用来转染不同哺乳动物的多种神经细胞。
试剂盒组分(100μl体系,24 Test)
- 细胞特异性核转染液(2.25 ml)
- 添加剂(0.5 ml)
- pmaxGFP阳性质粒(50μg)
- 单孔电转杯(100μl)(24个)
Nucleofector 细胞核转染技术操作步骤(详细Protocol请登录Lonza官方网站查阅)
整个操作过程只需四步,非常简单、高效。
第1步:处理细胞,精确计数
第2步:混合DNA、转染液,重悬细胞,加入转染杯
第3步:将转染杯放入转染仪,按键选择相应程序,按"start"键开始转染,10秒钟左右
第4步:取出细胞继续培养。
延伸阅读——原位转染
“原位核转染技术”突破了传统电穿孔技术只能在细胞悬液中转染的缺陷,实现了贴壁细胞在培养的不同阶段中直接进行转染的核转染。原位转染技术实现了生理状态下(贴壁培养过程中)的转染,如Basic Neuron Nucleofector® AD 转染试剂盒。
2010年,Lonza推出了4D系统,其中利用X unit的16孔电转板条,推出了第一个原位核转染试剂盒;
2010年,Lonza推出了适用于96孔shuttle系统的新原位转染试剂盒——96孔电转板条。
2011年,Lonza推出了Y unit,可以直接在24孔细胞培养板中进行原位核转染
优势:
– 可在神经元贴壁生长的任何阶段进行原位核转染或多次进行原位核转染
– 原位转染前、中、后,神经元都培养在24孔细胞培养板中,维持贴壁生长的生理状态
– 唯一转染效率最高可达70%的非病毒转染方法
– 整个过程维持了细胞功能
– 适用于共聚焦显微镜下观察和分析