牛睾酮(T)ELISA试剂盒

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人内脂素（Visfatin）的含量。

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

牛睾酮(T)ELISA试剂盒实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被牛睾酮(T)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛睾酮(T)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

牛睾酮(T)ELISA试剂盒样本处理及要求

1.  血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.  血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.  细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材

1.   酶标仪（450nm）

2.   高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.   37℃恒温箱

4.   蒸馏水或去离子水

试剂盒组成

备注：

1.  标准品浓度依次为：120、60、30、15、7.5、0 ng/mL

2.  经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

注意事项

1.  严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2.  洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3.  消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4.  底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5.  避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6.  在储存和温育时避免强光直接照射。

7.  平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8.  任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9.  不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

试剂盒性能

1.  检测范围：3.75 ng/mL – 120 ng/mL。

2.  灵敏度：最低检测浓度小于0.1 ng/mL。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

牛睾酮(T)ELISA试剂盒相关产品推荐：

小鼠胃泌素(Gas)ELISA试剂盒

人钙卫蛋白(CALP)ELISA试剂盒

人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒

兔单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒

人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M2抗体(M-AChRM2)ELISA试剂盒

大鼠Na-K-ATP酶(Na-K-ATPase)elisa试剂盒

人维生素B2（VB2）elisa试剂盒

小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒

鸡α胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒

大鼠亚硝酸盐(NO3)ELISA试剂盒

小鼠毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒

鱼白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒

兔氨基端前脑钠素(NTProBNP)ELISA试剂盒

猪白介素16(IL16)ELISA试剂盒

人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒

人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒

小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒

兔Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒

牛锁链素(DES)ELISA试剂盒

人异质性胞核核糖核蛋白G(hnRNPG)ELISA试剂盒

人垂体腺苷酸环化酶激活肽38(PACAP38)ELISA试剂盒

硝基咪唑类ELISA检测试剂盒(定性)

人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒

人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒

小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒

小鼠二酰基甘油(DAG)ELISA试剂盒

大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒

人激肽释放酶8(KLK8)ELISA试剂盒

牛睾酮(T)ELISA试剂盒针对国内酶联免疫行业不同的需求，我们上海科顺生物科技有限公司特推出科研型elisa试剂盒、商用型ELISA试剂盒，我们均采用环保型包装材料，响应了国家节能减排的要求，同时，为了更好的适应客户需求，我们推出经济型ELISA试剂盒，让大家的实验更节省，公司在不断努力降低ELISA试剂原料成本，以便更好的节省ELISA试剂盒整体价格，相信不远的将来，ELISA试剂盒价格会更便宜，实验效果会更稳定！