常有用户提到细胞状态不好，
比如细胞不再透亮，
内部很多细碎的小黑点，
细胞形态不规则，
培养液变黄
.......
你的细胞又不舒服了，
我们建议
除了考虑血清和细菌污染的问题，
也不要忽视细胞老化

图1 HEK293细胞                  图2  MSC细胞

图1  实心箭头指示的是发生细胞老化的HEK293细胞，SA-β-gal染色阳性，而空心箭头指的是未发生老化的细胞。图2  被染上蓝色的是发生老化的MSC细胞, 未被染色的是未发生老化的细胞。
由图片可以看出老化细胞体积增大、细胞扁平。

1.在体外传代次数太多或太久

2.培养液营养不够

3.接种密度不当

4.培养液pH偏离

1. 防止细胞老化最主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种，特别是传代，不能等细胞太密了之后传，一般细胞建议长到70％融合度传代最好。

2. 换培养液应该根据自己细胞消耗培养基的情况来确定是否该换。如果感觉时间不好把握的话就多培养几瓶细胞，在不同的时间换液，最后再来比较下，看什么时候换液好，得出自己的结论。

3. 选择正确的血清与培养基：细胞对血清特别敏感，直接影响细胞的生长。一定要选择适合的血清不然就会因营养物质不协调而导致细胞老化。

4. 在间充质干细胞培养时必然要进行消化，但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用，因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度，不然就会使细胞老化或者分化。 

5. 在开始养细胞传代时，也要特别注意冻存细胞，以保持细胞有种子存在，可以有效避免细胞损伤。

6. 此外，老化后的细胞很难再重新年轻化，重新复苏吧！

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