豌豆胰蛋白酶抑制因子(STI)ELISA试剂盒
适用于检测人动植物组织匀浆、细胞上清、血清、血浆、尿液或其他相关生物液体中浓度。
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒规格及配置  
 

名称	96孔配置	48孔配置
微孔酶标板	12孔×8条	12孔×4条
标准品	0.3mL*6管	0.3mL*6管
样本稀释液	6mL	3mL
检测抗体-HRP	10mL	5mL
20×洗涤缓冲液	25mL	15mL
底物A	6mL	3mL
底物B	6mL	3mL
终止液	6mL	3mL
封板膜	2张	2张
说明书	1份	1份
自封袋	1个	1个

自备物品
①.酶标仪（450nm）
②.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
③.37℃恒温箱
操作步骤
①．从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
②．设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
③．样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
④．除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
⑤．弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次   （也可用洗板机洗板）。
⑥．每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
⑦．每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。