文章

蛋白质电泳分子量标准试剂的取用规则

2020-03-02     来源:本站     点击次数:833

蛋白质电泳分子量标准试剂的取用规则:

()试剂不能与手接触。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,*不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,方可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。

蛋白质电泳分子量标准 实验步骤

()实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(0mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-0 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:)抽提(0,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:)抽提(0,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入/4V体积0M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)0,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:)抽提两次,异戊醇(24:)抽提次(0,000rpm,4℃,5min)
(0)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
()2,000rpm,4℃离心20 min
(2)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(3)加200ul的DEPC处理水溶解
(4)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
相关文章 更多 >