检测细胞增殖需要使用的仪器与试剂清单
2020-06-15 来源:本站 点击次数:1364
许多小伙伴不知道自己检测细胞增殖的时候究竟该检测什么？使用哪些试剂？今天，百萤将总结的可以测量细胞增殖的方法、试剂、适用仪器等分享给大家。
细胞增殖可以通过测量诸如新合成的DNA、总核酸含量或细胞分裂等参数来确定（见表1）。 最简单的方法是使用可与胺反应的细胞跟踪指示剂（例如CytoTell 染料）监视细胞分裂，这些可渗透细胞的指示剂与细胞质蛋白共价结合。由于这种共价偶联反应，CytoTell 染料无法转移到相邻细胞中，并且可以在细胞中保留好几代（最多可以观察到9代）。随着细胞分裂，CytoTell 染料在子细胞之间均等分布，并且每一代新细胞的荧光强度均是其亲本的一半。可以使用标准的含甲醛固定剂和基于皂苷的透化缓冲液对用CytoTell 染料标记的细胞进行固定和透化，以进行进一步的细胞内分析。
表1.用于检测细胞增殖的试剂和检测列表。
| 检测类型 | 原理 | 试剂/测定 | 仪器 |
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检测细胞分裂 |
使用与细胞质蛋白结合的可渗透细胞的染料。（随着细胞分裂，染料被转移到子细胞。新一代细胞的荧光强度是其亲本的一半。） |
荧光酶标仪，荧光显微镜或流式细胞仪 |
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检测新合成的DNA |
在细胞周期的S期将修饰的核苷酸掺入新合成的DNA中。一旦掺入，这些核苷类似物就可以用作细胞周期和增殖标记物，可以使用标记的探针进行检测以鉴定增殖细胞。 |
Bucculite dT掺入细胞增殖荧光成像试剂盒 |
荧光显微镜 |
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BrdU （需要酶或荧光团标记的抗BrdU抗体） |
可适用于比色，荧光或化学发光仪器 |
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检测总核酸含量 |
使用可渗透细胞的核酸染色剂，该试剂能展现出与DNA质量成比例的发射信号。然后对染色的群体进行流式细胞术分析，以生成DNA直方图，观察细胞周期每个阶段中细胞的百分比。 |
流式细胞仪 |
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