免疫因子elisa试剂盒操作步骤：

1、使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7、每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9、在450nm波长处测定各孔的OD值。

免疫因子elisa试剂盒产品特性：

1、应尽量选择正规厂家，产品经相应部门审核认可，试剂应从灵敏度、特---、精密度、稳定
性、简便性、安全性及经济性全面评价。

2、灵敏度：有二层含义，1为试剂检出被检物质的低量的能力；2为试剂对大量样品中阳性检出的能力。

3、特---：常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标。

4、精密度：elisa试剂一般指其批内cv%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。

5、准确度：通过添加回收实验进行评价。

6、简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性实验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。

7、安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无---。

8、经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，而市场价格比较合理。

9、试剂评价：需要有---的确证方法和确证的样品进行检测。