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使用切向流过滤进行胞外囊泡的浓缩和洗滤

2021-03-16     来源:本站     点击次数:1783

来自瑞典KTH皇家理工学院等的研究人员在2021年1月份的《bioRxiv》杂志发表了题为“Multiparametric Profiling of Single Nanoscale Extracellular Vesicles by Combined Atomic Force and Fluorescence Microscopy: Correlation and Heterogeneity in Their Molecular and Biophysical Features”的文章。研究中,使用膜表面积370cm2、MWCO 300 kD的MidiKros® 中空纤维过滤器组件对制备的胞外囊泡(EV)进行浓缩和洗滤。

摘要:作为细胞间通信的关键参与者,纳米级细胞外囊泡(EV)为诊断和治疗提供了独特的机会。然而,由于其在分子和物理特性上的高度异质性,其细胞起源和功能特性仍然难以确定。本文首次结合利用荧光和原子力显微镜,研究了单个小EV (sEV)的膜蛋白组成、大小和机械特性等多个EV参数。此外,还研究了它们在不同细胞源中的相关性和异质性。本研究针对来自人胚胎肾293、脐血间充质基质和人急性单核细胞白血病细胞系的sEV进行了研究,鉴定出常见的和细胞系特异性的sEV亚群,这些亚群具有不同的常见四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)分布和生物物理特性。虽然各个sEV的四跨膜蛋白丰度与其大小无关,但CD9和CD63的表达水平有很强的相关性。然而,在所有的细胞系中也发现了一个具有较高丰度共表达所有三种四跨膜蛋白的sEV群体,其平均直径<100 nm,杨氏模量相对较低。这种多参数方法有望为EV生物学和功能提供新的见解,潜在地破解该领域尚未解决的问题。
 

原文:S.Cavallaro, F.Pevere, F.Stridfeldt, et al., Multiparametric Profiling of Single Nanoscale Extracellular Vesicles by Combined Atomic Force and Fluorescence Microscopy: Correlation and Heterogeneity in Their Molecular and Biophysical Features. bioRxiv, 2021, doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.22.427773.



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