流式实验无染色/弱染色常见原因及实用对策：
1.抗体贮存和操作不当
抗体应保存在2-8℃中，避光保存，同时避免反复冻融
2.荧光染料淬灭
荧光抗体和荧光抗体染色后的样本都应该避光保存
3.自发荧光较高
改变抗体的荧光染料形式，避开与自发荧光相同发射光的染料
4.染色时间和温度不正确
适当调整染色时间和温度
5.使用错误的染色液染色细胞内蛋白
为了获得最佳细胞内蛋白染色，应该使用正确的缓冲液系统进行细胞固定并破膜，以检测胞浆和细胞核蛋白
6.分泌性胞内蛋白
流式细胞检测时，细胞因子、趋化因子和生长因子等分泌性蛋白必须保留在细胞内
7.蛋白质下调，内化或从细胞中被剪切
确定使用的刺激条件不会影响蛋白质定位
8.蛋白的表达水平过低
对于表达水平过低的抗原，染色时使用最亮的荧光染料，两步法染色有时可以提高敏感性，例如先使用生物素化抗体，再使用荧光结合二级抗体染色
9.细胞的分离方案或冷冻贮藏破坏抗原
从固态组织或细胞培养皿中收集细胞使用的酶会破坏细胞表面蛋白质，尝试用非酶的试剂制备细胞。检测制备细胞的试剂和细胞的贮藏/处理，是否可能影响抗原
10.激光器性能异常
使用流式细胞仪设定&跟踪（CS&T）微球，以检查激光的校准和功能
11.使用的滤片不正确
检查所用荧光染料的激发波长与发射波长，确保使用正确的激光和滤片收集数据
12.数据过度补偿
利用单染色对照和荧光减一（FMO）对照为每次实验设定补偿
13.细胞群的设门不正确
确保对细胞群的正确设门，使用活性染料并对单细胞群设门，可大幅度减少假阳性
14.数据分析不正确
为最佳显示稀有细胞或染色暗淡的细胞，利用双参数图观察细胞