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粪便隐血定性检测试剂盒(邻联甲苯胺法)使用说明书

2021-11-15     来源:本站     点击次数:2432

粪便隐血定性检测试剂盒(邻联甲苯胺法)
 
一、产品简介:
粪便的化学检查有酸碱度反应、隐血试验、胆色素和脂肪测定等,其中隐血试验最具有重要的临床应用价值。上消化道出血量小于 5ml,粪便中无可见的血液,且红细胞破坏,显微镜检查也未见红细胞,而需要用化学法、免疫法、转铁蛋白法、血红蛋白荧光测定法等才能证实的出血,称为隐血,检查粪便隐血的试验称为粪便隐血试验(fecal occult blood test , FOBT)。化学法常用试剂有邻联甲苯胺、匹拉米洞、愈创木脂、无色孔雀绿、米土尔等。
雅吉生物粪便隐血定性检测试剂盒(邻联甲苯胺法) 的检测原理是血红蛋白中的亚铁血红素具有类似过氧化物酶的活性,能催化 H2O2 作为电子受体使色原底物邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显绿色→蓝色,其颜色深浅与血红蛋白含量成正比,根据显色的快慢可以半定量血红蛋白即隐血含量,因此也可称作粪便隐血半定量试验。
本试剂盒多用于人或动物粪便血红蛋白检查,应注意的是正常人或动物消化道也会微量出血或受到刺激后出血,或者模型动物饲料含有鱼粉、铁剂等,都可能导致试验结果出现假阳性。本法特点是灵敏度高、假阳性高,可检出 Hb 0.2~1.0ug/ml。可联合使用中灵敏度、中特异性的匹拉米洞法。本试剂盒仅用于科研领域,不用于临床诊断或其他用途。
 
二、产品组成:
名称规格 100T 300T 存储
试剂(A): O-tolidine Solution 10ml 30ml 4℃ 避光
试剂(B): 氧化剂 10ml 30ml 4℃
使用说明书 一份
 
三、操作步骤(仅供参考):
1、粪便标本应尽快收集并及时检测,避免长时间放置使反应的灵敏度降低,避免接触水。
2、用取样木片或牙签挑取少量粪便10~50mg(绿豆大小),涂在消毒棉或白瓷板上。
3、滴加 O-tolidine Solution 2 滴(约 0.1ml)于粪便不同位置。
4、滴加 氧化剂 2滴(约 0.1ml),立即计时并观察颜色变化。
5、于2min内判读完毕。如2min内有蓝色出现,提示粪便含有血红蛋白(Hb)或粪便隐血试验阳性。
  
四、结果判断:
 
颜色变化 判读
加入试剂后立即呈现蓝黑褐色 (4+)
加入试剂后立即呈现蓝褐色,并逐渐呈黑褐色 (3+)
加入试剂后初显浅绿色,逐渐呈明显蓝褐色 (2+)
10s 后由浅绿色渐变为绿色 (+)
2min 内不显色 阴性


五、注意事项:
1、在粪便标本采集、运送过程中和使用试剂进行检测时,操作人员应做好个人防护,避免人体接触,以防止可能产生的污染和自身感染。
2、正常人或动物消化道也会微量出血或受到刺激后出血,导致本法有时会出现假阳性。
3、对无任何明显症状但怀疑可能有少量出现的情况,建议至少连续3天取样,并从不同样本部位取材做两次实验。
4、应提前3天以上禁止食用动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、中药或其他特殊药物,以免出现假阳性反应。
5、对于结肠炎模型的实验动物,饲料成分不应含有鱼粉、铁剂或其他特殊药物,以免出现假阳性反应。
6、O-tolidine Solution 含有乙酸,刺激性比较大,应在通风橱里操作。
7、氧化剂应注意密封4℃保存,6个月之后效率可能会下降。可用市售过氧化氢(30%)或过氧化脲配置1~3%的溶液。
8、如有必要可用血液或血红蛋白溶液做梯度对照实验。
9、本试剂盒不能与氧化剂共同存放,并避免阳光直射及高低温储存环境。
 
六、有效期:12 个月有效。
 
七、存储: 4℃运输,4℃保存。

附表 :
表 1粪便隐血试验化学法的干扰因素与评价

干扰因素 假阴性 假阳性
 
标本
粪便标本陈旧灵敏度降低,血液在肠道停留过久,血红蛋白
被细菌降解,血红素消失。
粪便隐血来源于非消化道出血如齿龈出血、鼻出血、月经血等。
 
食物和药物
 
含有大量维生素C 或其他具有还原作用的食品或药物
含血红蛋白的动物血,如鱼、肉、肝脏; 含过氧化物酶的叶绿素新鲜蔬菜;食用铁剂、铋剂;引起胃肠道出血的药物如阿司匹林、皮质固醇、非固醇类抗炎药、引起肠炎药物、秋水仙素、萝芙木碱、中药等
 
器材和试剂
过氧化氢浓度低或失效、试剂保存温度和湿度不当如冰冻、
受光、受热等失效
器材污染铜离子、铁离子、消毒剂、溴、铁、硼酸、过氧化酶等
操作 试验反应时间不足、显色判断
不准确
试验前在标本中加水降低了灵敏度,实际
上是增高了假阳性
 
 2便化学法的评价
方法 特点 评价
 
邻联甲苯胺法
高灵敏度假阳性高 Hb 0.2~1.0mg/L,消化道有 1~5ml 出血即可检出。灵敏度过高方法,粪便有微量出血即呈阳性反应,故高灵敏度试验阴性时,即确认隐血为阴性。
匹拉米洞法 中灵敏度
中特异性
Hb 1~5mg/L,消化道有 5~10ml 出血时可检出。
 
愈创木脂法
低灵敏度高特异性 Hb 6~10mg/L,消化道有 20ml 出血时可检出。受食物、药物影响因素少,假阳性低,故如低灵敏度试验阳性时,
即可确定为隐血阳性。

附图:不同浓度血红蛋白的显色效果对比
(从左至右血红蛋白溶液浓度依次为 10ug/ml、50 ug/ml、200 ug/ml)
 
相关产品:
 
产品编号 产品名称
YS0032DC Masson 三色染色液
YS0005DG 糖原 PAS 染色液
YS0006DH 苏木素伊红(HE)染色液
YS00635R 水合氯醛溶液(10%w/v)
YS00644R 实验动物标记染色液(红色)
YS00920R 血红蛋白溶液(1mg/ml)
YS10128R 枸橼酸钠抗凝剂(3.8%)
YS0511 粪便隐血定性检测试剂盒(邻联甲苯胺法)
YS0711 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 微板法)
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