多通道毛细管电泳仪系统在蛋白药物纯度及电荷异质性表征中的应用
2022-04-02 来源:SCIEX 点击次数:1390蛋白药物是一类重要的高效治疗药物，单克隆抗体已成功用于多种疾病的治疗。新型的蛋白药物如双抗，融合蛋白，ADC药物等也越来越多的出现在各种医学领域。蛋白药物的纯度和电荷异质性表征在药物生产的研发和质控等阶段都是至关重要的。然而，随着生物制药企业在其开发管线中的候选药物的越来越多，分子复杂性增加，对分析通量的要求越来越高。
BioPhase™ 8800系统是SCIEX推出的新一代多通道毛细管电泳仪(图1)，它的卡盒由 8 根毛细管组成，其并行采集和处理数据的能力，将分析时间由原来的几周甚至几个月缩短到几天。利用BioPhase™ 8800系统，分析科学家可以在有限的时间内同时进行大量样本的表征研究，包括稳定性，降解研究，优化存储条件或其他关键质量属性，极大地提高了分析的效率。
图 1. BioPhase™ 8800系统
主要特点
- 多通道毛细管卡盒 (图2)，可同时运行多达8个样品，实现平行样品分析；
- 集成光学模块通过软件控制自动切换，可以在单个序列中同时使用UV和LIF检测；
- 使用符合ANSI标准的96孔板进行样品和试剂制备，允许自动制备样品和试剂；
- 基于循环液体的卡盒温控系统，严格控制分离温度。
图 2. BioPhase™ 8800系统8通道毛细管卡盒
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图3. 同一样品 (IgG control standard) 在 8 个通道上的CE-SDS结果
与SCIEX PA 800 Plus系统相比，SCIEX BioPhase™ 8800系统具有以下特点：
1. 通量高，分析速度快。PA 800 Plus系统运行16针样品的时间，用 BioPhase™ 8800系统可运行128针；
2. 与 PA 800 Plus系统结果一致，可以很方便的将 PA 800 Plus系统的方法转移到 BioPhase™ 8800系统上实现。
3. 重复性好，8个通道连续运行16针，在 BioPhase™ 8800系统上128个数据迁移时间RSD值为 1.10%。
二． 高通量多毛细管电泳进行蛋白CIEF电荷异质性表征
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十二烷基硫酸钠毛细管凝胶电泳 (CE-SDS) 是蛋白质药物快速表征、释放和稳定性测试最常用的技术之一。SCIEX BioPhase™ 8800系统采用了多毛细管设计，能够同时进行多个样本的纯度表征。
图4. 同一样品( NIST 单抗)在 8 通道中的CIEF结果
BioPhase™ 8800系统进行CIEF实验具有以下特点：
1.多重批量数据采集和处理能力，以支持蛋白的高通量电荷异质性筛选；
2.改进的算法可以基于pI进行数据分析和峰值报告，减少数据处理时间和人为干预；
3.多通道毛细管并行采集样品，缩短开发和分析时间，96孔板样品分析的时间从单通道的5天缩短为12小时；
4.结果与单通道PA 800 Plus系统的等电聚焦参数具有良好的相关性，可以很容易将方法从单毛细管系统向多毛细管系统的转移。