慢性束缚是抑郁症常用的应激模型,可操作性强,重复性好,可以模拟抑郁症的核心症状——缺乏兴趣。本研究从社会应激的角度出发,加入了孤养的应激方法,使模型更符合抑郁症发病的理论基础。糖水偏好实验是评价兴趣缺失的经典实验。本研究结果显示,慢性束缚模型组糖水偏爱指数下降,与正常组相比有显著性差异,说明抑郁模型成功。
社交回避试验是一种可操作性很强的啮齿动物社交行为评价方法。经典的方法是三箱社交回避测试。长方形的盒子被两块挡板分成三个盒子,盒子上有门,供动物自由穿梭。该实验允许受试动物做出接近或逃避的选择来刺激小鼠,具有较高的灵敏度。动物自由适应三个盒子的环境后,在两端的每个盒子里放一个鼠笼,其中一个盒子里装刺激老鼠,另一个是空的鼠笼。将受试动物放在中间的箱子里,打开两边的门,收集动物接触受刺激小鼠和空鼠笼的时间、频率和潜伏期,以及动物在两端箱子里的运动距离、时间和进入频率,并据此描述动物的社会偏好行为。动物行为轨迹分析软件采用头-体-尾三点跟踪法,其精度与摄像头与被测动物的距离有关。距离越短,跟踪越精确。这项研究是基于三箱法,有一些变化。两个鼠笼放在一个方形盒子的对角,方形盒子的长度是三个盒子结构的1 /2,这样可以降低摄像头的高度,动物行为轨迹分析软件可以更精确地跟踪动物的头、身、尾三个点。
测试方法
将动物随机分为正常组和慢性束缚加孤养组,每组10只。在模型组,动物被饲养在一个笼子里。关于长期约束的方法,请参考参考文献。将动物置于50毫升离心管中(在离心管上烧几十个直径为2毫米的孔以通气),每天束缚4小时(10: 00 ~ 14: 00),共35天。A组:每笼5只正常动物,置于另一个房间,无任何干预。造模后进行糖水偏好试验和社交回避实验。
动物行为分析软件
VisuTrack动物行为跟踪软件(上海欣软,中国)自动实时跟踪动物的轨迹数据,计算动物在箱体内的活动情况和接触行为。
糖水偏爱测试
根据文献报道,糖水偏好测试方法分为训练期和测试期。在训练期间,动物在最初的24小时内被给予两瓶1%蔗糖水、一瓶1%蔗糖水和一瓶纯水。测试前不禁食不喝水。在测试期间,动物还被给予一瓶1%的蔗糖水和一瓶纯水15小时。为了避免位置偏好的影响因素,在测试中间,交换两个瓶子的位置。测试结束后,计算糖水喜好指数(糖水喜好指数=糖水消耗量/总液体消耗量× 100%)。
社交回避实验
动物适应试验室1小时后,进行社交回避实验。根据文献记载,首先将动物置于50 × 50 × 50 cm的方形开口箱中,自由适应5 min。测试时,在敞开的箱子的一个角落里放一个空的鼠笼,在对面的角落里放一个同样的鼠笼,在鼠笼里放一个陌生人。笼子上有圆孔,实验小鼠和刺激小鼠可以通过气味接触。将实验大鼠置于开口箱中,用
VisuTrack行为追踪系统记录实验大鼠在10分钟内接触空笼和刺激笼的时间和频率,以及首次接触笼的潜伏期。实验结束,取出实验小鼠,放入笼子。偏好指数=实验大鼠暴露于刺激笼子的时间/暴露于空笼子的时间。接触行为为主动嗅闻,定义为实验小鼠鼻尖与笼子的距离在2 cm以内。
总结
鉴于抑郁症临床表现的多样性,应激抑郁动物模型的行为学评价也逐渐趋于多样化,结合经典评价方法形成了二维评价体系。社会能力,尤其是社交能力,在应激抑郁动物模型的行为评价中备受关注,
社交回避实验在应激抑郁模型的行为评价中可能具有与强迫游泳和悬尾实验同样重要的价值。研究表明,社交回避实验和悬尾实验有很好的相关性。另一方面,丙咪嗪、地昔帕明等抗抑郁药能明显改善动物模型的社会能力,提示其具有良好的预测效度。本研究将环境应激和社会应激因素相结合,建立慢性束缚和孤儿养育模型,观察社会回避实验对社会行为的影响。结果表明,慢性束缚模型组受刺激小鼠的探索时间和次数明显减少,探索潜伏期明显延长,社会偏好指数明显下降,表现出一定程度的社会回避。这与Van等人报道的结果一致,即简单的慢性束缚可以导致小鼠的社交回避。
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