(1）固定;大鼠或小鼠灌注取脑,取脑后用多聚甲醛浸泡固定,即能达到冲洗的目的，又不损害组织。
(2）脱水;先后用15%、20%、30%的PB蔗糖溶液进行脑组织梯度脱水，脑组织沉下去就是脱水好了。(3）冰冻切片;推荐瑞沃德冷冻切片机。取出脑组织,用OCT胶包埋,一层层的包埋。
【注意事项】不能有气泡,否则影响切片。不能留有空隙,否则会冻坏脑组织。冰冻切片的温度一般再-18℃～-25℃之间，脑组织最好是-18°℃。