使用动物源胰酶，我需要面对什么？

PART01

1.外源病毒趁机而入

动物源性蛋白质可能夹杂哺乳动物病毒，大多数生物制药纯化工艺的纯化流程都有病毒失活步骤，但有些病毒对典型的病毒灭活方案特别有抵抗力。此外，一些活病毒疫苗不能通过病毒灭活步骤。病毒污染风险依旧伴随动物源胰酶的使用存在。

表1.主要病毒灭活工艺和去除方法

2010年的G公司和M公司的两种已获批准的小儿轮状病毒疫苗被报道含有猪病毒DNA序列污染，随后被归因于用于制造疫苗的细胞库中使用胰蛋白酶。由于尚不知道这种猪病毒会传染给人类，疫苗仍在市场上销售。病毒的污染风险是使用动物源原料无法避免的问题。

PART02

朊病毒、支原体等污染也不容小觑

（1）朊病毒风险

图1.朊蛋白同化

朊病毒蛋白质不能轻易被移除或灭活，检测也很困难。这种风险很难评估，对朊病毒通过生物制品传播的担忧无疑是推动生物制药生产向无动物源(AOF)试剂发展的主要因素。

（2）支原体污染

图2.支原体结构

使用动物源胰蛋白酶制剂还可能带来支原体等污染物，最常见的是猪支原体。其可以在胰蛋白酶溶液中存活，因此，使用猪源性胰蛋白酶有可能给培养的细胞带来支原体污染。

PART03

法规与监管双重压力

对于那些开发使用动物源性胰蛋白酶的工艺，现在可能还存在额外的监管障碍：

图3.CBER关于动物源胰蛋白酶要求

CBER工业指南有一个关于胰蛋白酶的章节，指出应根据胰蛋白酶是牛源还是猪源进行额外的检测。

图4.欧洲药品管理局关于动物源胰酶的说明

欧洲药品管理局发布的关于在人类生物药品生产中使用猪胰蛋白酶的指南草案建议使用两种不同的细胞系来测试可能在猪胰蛋白酶中发现的不定因子，需要做额外的测试。

PART04

走出困境靠什么——重组胰酶

要解决动物来源的问题，最有效的方法之一是采用重组技术生产，利用微生物生产重组胰酶是更为安全的替代产品。由于排除了动物来源的原料，在产品纯度、活性以及稳定性上有了很好的提升和保证。