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红细胞渗透脆性检测试剂盒(比色法)使用说明书

2023-02-23     来源:本站     点击次数:519

红细胞渗透脆性检测试剂盒(比色法)使用说明书
 
产品简介:
红细胞(Red blood cell,RBC)也称红血球,是血液中数量最多的一种血细胞,脊椎动物体内通过RBC运送氧气,RBC同时还具有免疫功能,在贫血检查中可通过红细胞渗透脆性试验来检测红细胞膜的缺陷。
雅吉生物红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)(Erythrocyte Incubated OsmoticFragility Assay Kit)检测原理是将患者血液置于37℃孵育24h,使红细胞代谢继续进行,由于葡萄糖的消耗,储备的ATP减少,导致需要能量的红细胞膜对阳离子的主动传递受阻,造成钠离子在红细胞内聚集,细胞膨胀,孵育渗透脆性增加,某些有细胞膜缺陷以及某些酶缺陷的红细胞的葡萄糖和ATP很快被耗尽时,孵育渗透脆性明显增加,该实验被称为红细胞孵育渗透脆性试验,主要用于检测人、动物血液的红细胞孵育渗透脆性,并计算红细胞中性脆性(MCF)。 该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
 
产品组成:
名称 50T Storage
试剂(A):NaCl Phosphate Buffer 100ml 4℃
试剂(B):ddH2O 100ml RT
 
自备材料:
1、小试管
2、分光光度计
3、比色杯
 
操作步骤(仅供参考):
1、取肝素抗凝血2ml ,分成2份,1份立即实验,另1份密闭37C孵育24h后再作实验。
2、取小试管或恰当容器,依次编号,按照下表稀释成不同浓度。每次检查应设正常对照。
 
试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
试剂A(ml) 3.4 3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 0.8 0.4
试剂B(ml) 0.6 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.2 3.6
NACL浓度(g/L) 8.5 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.0 1.0
 
3、分别吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCI稀释液中轻轻混匀,室温(20°C)静置30min。
4、将各管再次混匀1次,离心沉淀5min,取上清液。
5、用分光光度计检测540nm波长,以NaCI Phosphate Buffer 作为空白管调零,测定
各溶血管的吸光度。
6、计算溶血百分率∶以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度为100%,计算相应氯化钠浓度
的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。
7、计算红细胞中性脆性(MCF)∶以溶血百分率为纵坐标,以氯化钠浓度为横坐标,作溶血
曲线图,即为红细胞盐水渗透脆性曲线。在曲线上,50%溶血的氯化钠浓度为红细胞中性脆性(MCF)。
 
参考区间︰
未孵育,50%溶血氯化钠浓度 4.00~4.45g/L
37℃孵育24H,50%溶血氯化钠浓度 4.46~5.9g/L
 
注意事项:
1、每次检查应设正常对照。
2、NaCl Phosphate Buffer pH值及温度必须恒定,pH改变0.1或温度改变5%,均可
使结果偏差0.01%。
3、NaCl Phosphate Buffer采用高纯度氯化钠配制,普通氯化钠不宜采用。
4、NaCl Phosphate Buffer不要被酸碱污染,同时注意密闭保存。
5、血液样品应直接滴入液体,不宜沿管壁流入。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
有效期∶12个月有效,4℃保存。
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