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流动下条件下活细胞实时成像设置详解

2023-02-21     来源:本站     点击次数:822

活细胞成像是在流动条件下细胞培养分析的一种可能的体现。

根据实验的持续时间和温度要求,有几种可能的设置具有不同的优点和缺点,本说明中显示和讨论了这些设置。

1. 无需培养箱即可设置

设备:

  • 放置在显微镜旁边的 ibidi 泵系统

  • 倒置显微镜

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优点:

  • 沿灌流管的均匀介质温度。

  • 气泡产生的可能性低。

  • 在较长时间内非常稳定。

  • 成本极低且易于操作。

缺点:

  • 细胞处于室温。

  • 没有向细胞培养基供应 CO2(碳酸盐缓冲液不起作用)。

适合:

  • 可以在室温下培养的细胞或生物。

  • 没有细胞的实验。

  • 如果细胞耐受温度下降,则可能用于短期成像。



2. 设置载物台顶部培养装置

设备

  • 放置在显微镜旁边的 ibidi 泵系统

  • ibidi 载物台顶部培养系统(气体混合器和温度控制器)控制舞台顶部培养室的温度、二氧化碳和湿度。

  • 倒置显微镜

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优点:

  • 细胞处于适宜的温度。

  • 成本低。

缺点:

  • 沿灌流管的温度梯度可能有产生气泡。

  • 低 CO2 输入到培养基中。孵育室(提供 CO2)中的暴露时间非常短。

  • 长期不稳定。

适合:

  • 短期实验。



3. 设置载物台顶部培养装置和台式培养箱

设备:

  • ibidi 泵系统

  • 台式培养箱

  • ibidi 载物台顶部培养系统(气体混合器和温度控制器)控制载物台顶部培养室的温度、二氧化碳和湿度。

  • 倒置显微镜

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优点:

  • 细胞可以保持在 37°C,因为培养基的冷却只发生在从培养箱到载物台顶部培养的管道中。

  • CO2 供应提供给储存器培养基和通道玻片。为获得最佳 CO2 供应,泵回端口连接到小型培养箱的气体。

  • 中长期稳定。

缺点:

  • 沿灌注管的温度梯度可能会在长时间内会产生气泡。

适合:

  • 细胞需要控温的长时间培养。

  • 更长的时间段,带有额外的气泡捕集器

 

 

 

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