利用荧光染料识别细胞结构成分和监测细胞毒性或细胞对生长信号的反应是很好的。关于细胞的分析,可以从多个角度切入,如细胞活性、亚细胞器的追踪、细胞凋亡与自噬的检测、细胞耐药性、细胞氧化性压力、细胞浦西追踪、活细胞衰老检测、细胞内蛋白聚集检测、细胞周期检测等。针对上述细胞研究领域,都有相应的检测手段和方法去实现,接下来本文就针对不同的角度来给大家做介绍:
十一种常见细胞分析方法及相关检测试剂
1.细胞死亡与自噬
经历凋亡和坏死过程的细胞会包括健康细胞,早期凋亡细胞,晚期凋亡细胞和坏死细胞。可以通过对不同阶段的细胞染不同的颜色来分辨该细胞系经历到了哪个阶段。推荐使用APOPTOSIS/NECROSIS DETECTION KIT (GFP-CERTIFIED®) (ENZ-51002)这个试剂盒来进行细胞凋亡和坏死过程的监测。如果是想监测活细胞中自噬的情况,可以使用CYTO-ID® AUTOPHAGY DETECTION KIT(ENZ-51031)这个试剂盒
2.细胞氧化性压力
氧化性压力被定义为活性氧(ROS)的相对过剩,氧化性压力相关的染料包括监测活性氧积累和线粒体功能受损的探针,这两者都与衰老、癌症、糖尿病、心血管疾病和神经变性的病理有关。
在活细胞中对总活性氧含量及超氧化的定量分析可以通过ROS-ID® TOTAL ROS/SUPEROXIDE DETECTIONKIT(ENZ-51010)试剂盒完成。其原理是ROS的存在通过可普遍检测的ROS染料的荧光探针实现(绿色),而超氧化分析则通过SO-特异性的荧光染料来实现(黄色)。
对于线粒体功能受损情况的检测,可以通过MITO-ID® MEMBRANE POTENTIAL CYTOTOXICITY KIT – (ENZ-51019)来实现。该试剂盒的检测功能是通过双放射性染料来实现的,绿色荧光代表单体结构,而橙色荧光则代表聚集体结构,橙色荧光的下降及证明了MMP(线粒体细胞膜电位)的下降。
3.钙离子动员反应
细胞内的钙离子是一个很常见“第二信使”,即胞内信号分子,负责细胞内的信号转导,进而影响到其他的细胞过程,如细胞分化、迁移、增殖、存活及凋亡。细胞内钙离子通常会用做GPCR激活程度的初步指标。
使用FLUOFORTE® CALCIUM ASSAY KITS (ENZ-51016 / ENZ-51017)试剂盒可以通过荧光染色的方法对钙离子动员反应进行检测,其染色探针有超强的细胞穿透性和留存性。
4.亚细胞结构染色与活细胞分析
使用细胞器选择性染色剂或染料让细胞器显色是细胞和组织荧光成像的关键,多色的细胞器特异性染料可用于共定位研究和监测结构变化对化学或环境胁迫的反应。