< THP-1 细胞简介 >

THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液，有分化为多种巨噬细胞的能力，是各领域研究常用的细胞系之一。

THP-1是人外周血的单核细胞系，最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞，研究免疫和炎症的理想工具。其表面抗原HLA型为：A2，A9，B5，DRw1，DRw2。

营养体系：细胞生长环境宁酸毋碱，开启后的RPMI 1640培养基，建议一周内使用完毕。
推荐传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次。
培养条件：气相：95%空气+5%CO₂，温度：37℃


01. 培养攻略 - 复苏操作
/ 以T25培养瓶为例 /

1. 预热水浴锅至37℃；

2. 将细胞从液氮中取出后，放进一次性PE手套中，立即投入水浴锅，迅速用力摇晃管子，使其在1分钟内融化；

3. 酒精擦拭冻存管，进入生物安全柜，把融化的细胞悬液缓慢滴加到预先加入5ml完全培养液的T25培养瓶中；

4. 放入培养箱培养。​

• ​复苏密度建议1*10^6 cells/ml

• 48小时不要动细胞，不要晃动培养皿，可以先竖直放置培养基

• 通常需要3-5天恢复，期间不做离心操作

• 可先提高THP-1细胞量，再去考虑解决细胞聚团或碎片的问题

02. 培养攻略 - 传代操作
半换液法传代操作 / 以T25培养瓶为例 /

图片来源   thp-1细胞半换液 - Bing images

• ​营养液要给足。以T25培养瓶为例其营养液不要少于5ml

• 不要频繁观察细胞，最多一天一次即可

• 不要频繁离心换液，当发现培养基有些变黄（橘红色）再补液1-2ml即可

• 当细胞密度达到约2*10^6 cells/ml左右时（如果换液后培养基第二天便发黄，镜下检测无污染时）进行传代

• 一定不要每天离心！最多一周离心一次

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1. 预先配制好冻存液；【推荐使用VivaCell: C3522-0100，即用型冻存液】

2. 细胞约200g 3min离心后，去上清，用配好的冻存液重悬细胞；

3. 转移入冻存管，放进程序冻存盒。冻存盒放进-80度冰箱过夜，再放液氮长期保存。​

• THP-1细胞易受冻存影响，建议适量增加冻存细胞量(不低于1*10^6/支)

• 要在液氮中保存​

< 细胞聚团问题 >

1. 少量正常，建议不再处理，继续培养细胞量。

2. 若较多，建议排查培养箱、营养体系的酸碱性、以及是否有新换血清。

1. 此细胞很容易分化成为巨噬细胞。

2. 少量正常，建议传代时候丢弃。

3. 较多，建议选用非TC处理过的培养瓶、排查培养箱、营养体系的酸碱性、以及是否有新换血清。