新生牛血清成分与质量控制
2023-09-19 来源:本站 点击次数:190
胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。血清的成分虽然比较简单，但是还是有很多成分没有被破解，这也是一直让科研人员头痛的一件事，并且新生牛血清的成分还受供体的一些因素所影响，例如供体的年龄和生理状况，这些都会影响血清的成分，所以研究血清成分也是一件比较复杂的工作，那么新生血清包括以下成分：
1.蛋白质
新生牛血清的服务商介绍，新生牛血清中的主要成份中除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外，主要还有白蛋白，球蛋白。纤维粘连素 细胞促进细胞附着;胎牛血清中含胎球蛋白促细胞依附;转铁蛋白可以结合铁离子，减少其毒性会被细胞利用的可能。
2.多肽
血小板促生长因子能促细胞分裂，据专人介绍新生牛血清是多肽家族的重要成员，多肽拥有着重要的作用，比如它可以促进细胞增殖因子数量的增加，不仅如此，它还能够促成纤维细胞生长因子以及神经细胞生长因子等，据悉，虽然从数量上来看新生牛血清的含量比例少，但它能够促进细胞的增长。
3.激素
激素对细胞的作用是多方面的，胰岛素是可以促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关。而类胰岛素生长因子能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用。促生长激素：促细胞增殖效应。氢化ke的松：技术先进的新生牛血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化ke的松，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。
4.其他成份
新生牛血清中的氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大，与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
新生牛血清质量控制：
1、新生牛血清应无细菌、支原体污染。血清中含有细菌会直接造成细胞污染、制品污染，因此无菌是最基本的要求。另外细菌会产生内毒素，也称脂多糖。内毒素可以引起发热反应、白细胞反应、代谢性酸中毒、感染性休克、弥散性血管内凝血(DIC)。人及哺乳动物对内毒素异常敏感，疫苗中的内毒素含量高会引起人及动物的强烈反应，甚至被致死。所以生物制品及其原辅料对内毒素要求严格控制。按鲎试剂或内毒素检测仪操作程序测定，新生牛血清中的细菌内毒素含量应低于10EU/mL。
2、新生牛血清中应无牛病毒性腹泻/黏膜病病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等外源病毒污染。含有口蹄疫病毒抗体的新生牛血清对口蹄疫疫苗的生产干扰非常大，含有牛病毒性腹泻/黏膜病病毒抗体的新生牛血清对猪瘟活疫苗(细胞源)的生产干扰非常大。其他病的抗体也需要尽可能控制，抗体存在会影响生物制品的质量。
3、细胞增殖高质量的血清含有丰富的细胞生长必需的营养成分，它提供细胞贴壁所需的因子，还起着缓冲酸碱度、提供解毒、保护细胞不受伤害等作用。用Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞进行细胞增殖试验测定标准血清(胎牛血清)的绝对克隆形成率和新生牛血清的相对克隆形成率，规定标准血清的绝对克隆形成率应不低于20%，胎牛血清的相对克隆形成率应不低于80%，新生牛血清的相对克隆形成率应不低于50%。
4、新生牛血清中血清蛋白含量应在3、5%～5、0%(w/v)。新生牛出生14h内采血制备的血清，其血清蛋白含量一般都在这个范围之内，并且，采血时间越短，测定值越接近下限，小牛出生后存活的时间越长，其血清中的蛋白含量测定值越接近上限。
5、新生牛血清中的血红蛋白含量应不高于0。02%(w/v)。血红蛋白的含量直接影响血清中刺激细胞生长因子的活力。血红蛋白含量高的血清，颜色为暗红色，质量较差。
1.蛋白质
新生牛血清的服务商介绍，新生牛血清中的主要成份中除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外，主要还有白蛋白，球蛋白。纤维粘连素 细胞促进细胞附着;胎牛血清中含胎球蛋白促细胞依附;转铁蛋白可以结合铁离子，减少其毒性会被细胞利用的可能。
2.多肽
血小板促生长因子能促细胞分裂，据专人介绍新生牛血清是多肽家族的重要成员，多肽拥有着重要的作用，比如它可以促进细胞增殖因子数量的增加，不仅如此，它还能够促成纤维细胞生长因子以及神经细胞生长因子等，据悉，虽然从数量上来看新生牛血清的含量比例少，但它能够促进细胞的增长。
3.激素
激素对细胞的作用是多方面的，胰岛素是可以促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关。而类胰岛素生长因子能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用。促生长激素：促细胞增殖效应。氢化ke的松：技术先进的新生牛血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化ke的松，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。
4.其他成份
新生牛血清中的氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大，与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
新生牛血清质量控制：
1、新生牛血清应无细菌、支原体污染。血清中含有细菌会直接造成细胞污染、制品污染，因此无菌是最基本的要求。另外细菌会产生内毒素，也称脂多糖。内毒素可以引起发热反应、白细胞反应、代谢性酸中毒、感染性休克、弥散性血管内凝血(DIC)。人及哺乳动物对内毒素异常敏感，疫苗中的内毒素含量高会引起人及动物的强烈反应，甚至被致死。所以生物制品及其原辅料对内毒素要求严格控制。按鲎试剂或内毒素检测仪操作程序测定，新生牛血清中的细菌内毒素含量应低于10EU/mL。
2、新生牛血清中应无牛病毒性腹泻/黏膜病病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等外源病毒污染。含有口蹄疫病毒抗体的新生牛血清对口蹄疫疫苗的生产干扰非常大，含有牛病毒性腹泻/黏膜病病毒抗体的新生牛血清对猪瘟活疫苗(细胞源)的生产干扰非常大。其他病的抗体也需要尽可能控制，抗体存在会影响生物制品的质量。
3、细胞增殖高质量的血清含有丰富的细胞生长必需的营养成分，它提供细胞贴壁所需的因子，还起着缓冲酸碱度、提供解毒、保护细胞不受伤害等作用。用Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞进行细胞增殖试验测定标准血清(胎牛血清)的绝对克隆形成率和新生牛血清的相对克隆形成率，规定标准血清的绝对克隆形成率应不低于20%，胎牛血清的相对克隆形成率应不低于80%，新生牛血清的相对克隆形成率应不低于50%。
4、新生牛血清中血清蛋白含量应在3、5%～5、0%(w/v)。新生牛出生14h内采血制备的血清，其血清蛋白含量一般都在这个范围之内，并且，采血时间越短，测定值越接近下限，小牛出生后存活的时间越长，其血清中的蛋白含量测定值越接近上限。
5、新生牛血清中的血红蛋白含量应不高于0。02%(w/v)。血红蛋白的含量直接影响血清中刺激细胞生长因子的活力。血红蛋白含量高的血清，颜色为暗红色，质量较差。
相关文章
更多 >