无表面活性剂的植物组织总蛋白提取试剂盒使用说明书
2023-09-20 来源:本站 点击次数:817
无表面活性剂的植物组织总蛋白提取试剂盒
描述：
应用：
缓冲液配方：非公开
运输与储存：
重要产品信息
所需附加材料
操作方法：
描述：
无表面活性剂的植物组织总蛋白提取试剂盒，由优化蛋白提取缓冲液和离心管柱及 2.0ml 接收管组成，能够快速从植物组织中提取水溶性蛋白。蛋白提取缓冲液中不含任何表面活性剂和有机溶剂。使用了离
心管柱技术，提取的样品体积可以从 50ul-500ul。从植物组织（叶片，种子，软茎等）中提取无表面活性剂的总蛋白仅需不到 8 分钟的时间，得率可达 1-5mg/ml。
应用：
可应用于蛋白质组学研究(LC/MS)，IP， ELISA ，2D，等电聚焦，SDS-PAGE, immunoblottings 及其他应用。
缓冲液配方：非公开
试剂盒组分
50T： 4T：
1. 25ml DF-裂解缓冲液 1. 1.5ml DF-裂解缓冲液
2. 50 个离心管柱 2. 4 个离心管柱
3. 50 个收集管 3. 4 个收集管
4. 2 根塑料研磨棒 4. 1 根塑料研磨棒
运输与储存：
常温运输，4℃储存。
重要产品信息
Minute TM 无表面活性剂的植物组织总蛋白提取试剂盒可快速提取水溶性蛋白，蛋白酶抑制剂不是必须加入，但是如果下游实验需要较长时间或者蛋白提取后保存较长时间，建议在蛋白提取缓冲液中添加蛋白酶抑制剂。
研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入裂解缓冲液中。推荐使用 BCA 法测定蛋白浓度。
所需附加材料
台式离心机
BCA 蛋白定量试剂盒
操作方法：
以下步骤是从 50-100mg 植物组织（新鲜的叶片，种子，软茎和根）中提取。干燥的种子样品需要在水中浸泡 2 天。如果起始量较大或者较小，需按比例调整相应裂解液的用量。
1.将蛋白提取缓冲液和离心管柱及接收管套管放在冰上预冷。
2.植物叶片样品，取 50-100mg 新鲜组织，剪碎，卷起或者折叠减小体积放入离心管柱套管中，用 200ul 或 1ml 吸头反复挤压样品 50-60 次减小体积（样品小于 50mg 此步骤可忽略），接转第3 步骤。种子样品（新鲜或冷冻）和软茎，用锋利的刀片将其切成小片放入离心管柱套管中，用塑料研磨棒反复向下按压扭转研磨 50- 60 次，接转第 3 步骤。
3.加入 50-100ul DF-裂解缓冲液到离心管柱中（注意： 缓冲液使用前请用力摇匀，使沉淀物重悬），用塑料研磨棒反复向下按压扭转研磨 50-60 次（注意：塑料研磨棒可以重复使用，用蒸馏水彻底冲洗干净，用纸巾擦干）。
4.盖上盖子，冰上孵育 5 分钟。离心机最高速离心 2-5 分钟取出。弃去离心管柱，将接收管中蛋白溶液转入新的离心管中保存，无表明活性剂的蛋白提取完成可应用于下游实验。
请注意：部分未完全裂解的组织不会影响样品质量。
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