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血浆血清样品白蛋白去除剂使用说明书

2023-10-18     来源:本站     点击次数:634

人/动物血清和血浆是生物标志物鉴定的最佳样本。然而,大量白蛋白的存在干扰了许多检测和功能蛋白
质组学分析。血清白蛋白占总血清蛋白的 50-70%,严重干扰了 1D 和 2D 电泳的分辨率。本试剂可有效去除白蛋白,增加许多检测的灵敏度。与基于树脂结合白蛋白去除试剂盒(只处理微量样品)不同,Minute TM白蛋白去除试剂可以处理几微升到几毫升的样品。90%以上的白蛋白可以在不到 5 分钟内被除去。

包装:20ml(仅限科研使用)。根据起始样品体积,试剂足以处理几十到几百个样品。
运输及储存:常温运输,室温储存。

附加材料
台式高速离心机,去离子水,1X PBS。

操作过程:
1.将血清或血浆样品加入试管中。为了便于操作,我们建议将 100μl 未稀释或稀释的血清或血浆加入 1.5ml 离心管中。
2.加入等量的白蛋白去除剂,上下吹打混匀 10-20 次。
3.在室温下 14,000-16,000Xg,离心 2-3 分钟,弃去上清液(白蛋白部分)。慢慢加入 100-200 ul 去离子水,立即取出,清洗在管壁上残留的白蛋白。根据下游实验用 100-200μl 溶解液重新溶解沉淀,用于下游实验。

可优化操作:
1.按照上述方案可一次性去除动物血清或血浆中约 70%的白蛋白。为了去除更多的白蛋白,建议将样品沉淀再次去除白蛋白。例如:用 100ul PBS 重悬步骤 3 中沉淀,并重复步骤 2-3。
2.如果只有少量的样品可用,建议用 PBS 稀释。例如:用 PBS 1:2-1:10 稀释血清/血浆样品,并执行上述方案。
3.重悬的沉淀中含有血清蛋白和较高浓度的钠盐和其他盐分。它可直接用于 SDS-PAGE,但如果是做 2D 凝胶和其他一些分析,则需要脱盐处理后才可使用。
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