AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质的应用案例分享
2024-07-26 来源:博格隆微信公众号 点击次数:1484在上周的文章《博格隆推出抗体纯化新品AT Protein A Diamond Ultra》中，我们详细介绍了博格隆最新推出的AT Protein A Diamond Ultra亲和层析介质的核心特点和研发背景。
本期，我们将通过具体的应用案例和详实的测试数据，进一步展示这款产品在实际使用中的卓越性能，帮助大家更深入地了解博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料的强大功能。
产品性能
博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料通过将重组耐碱的Protein A配基与高刚性琼脂糖基架相结合，不仅显著提高了动态结合载量（≥75mg 人IgG/mL介质），还具备优异的耐碱性能，可耐受0.1~0.5M NaOH处理。
与前一代产品相比，博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料在载量、流速和耐用性等方面均有显著提升，能够满足从实验室到工业化大规模生产的各种需求。
+颗粒大小呈正态分布，D50值对应的粒度代表小于此粒度的颗粒体积之和与大于此粒度的颗粒体积之和相同。
++动态结合载量为3mg/mL的静脉注射用人IgG在PBS缓冲液中，接触时间为6min时的10%动态结合载量。
应用案例
• 样品信息：双抗，分子量148KDa
• 层析柱规格：EzScreen 4.3mL，柱高10cm
• 流速：0.7mL/min
• 平衡缓冲液：PB体系，pH7.2
• 洗脱缓冲液：NaAc-HAc 体系，pH3.3
动态结合载量测试数据
在本案例中，我们使用某双特异性抗体样品分别对12款市售填料进行载量测试， 记录其在10%流穿时的动态载量数据（见Fig. 2）。
测试数据显示，博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料的动态结合载量为43.88mg/mL介质，高于市场上的其他同类产品。在相同操作条件下，这一高载量使得该产品能够处理更多的样品，提升整体生产效率。
纯化过程及结果
通过对比纯化前后的样品纯度，我们发现博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料能够有效去除杂质，提高目标抗体的纯度。Fig. 3与Fig. 4展示了纯化过程中的图谱及纯化检测结果。
Fig. 4 纯化结果记录表案例二：高效纯化单克隆抗体
• 样品信息：某单抗分子，分子量148KDa
• 层析柱规格：EzScreen 4.3mL，柱高10cm
• 流速：0.7mL/min
• 平衡缓冲液：Tris-HCl体系，pH7.2
• 清洗缓冲液：柠檬酸体系，pH5.5
• 洗脱缓冲液：Gly-HCl体系，pH3.6
动态结合载量测试数据
在本案例中，我们用某单克隆抗体样品分别对博格隆三款抗体亲和填料进行载量测试，记录其在10%流穿时的动态载量数据（见Fig. 5）。
测试数据显示，博格隆Extrem A Diamond动态结合载量最高，为71.63mg/mL，博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料的动态结合载量与博格隆Extrem A Diamond接近，为69.44mg/mL。
纯化过程及结果
通过对比纯化前后的样品纯度，我们发现博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料能够有效去除杂质，提高目标抗体的纯度。Fig. 6与Fig. 7展示了纯化过程中的图谱及纯化检测结果。
通过具体的应用案例和详尽的测试数据，我们深入解析了博格隆AT Protein A Diamond Ultra亲和层析填料在实际应用中的卓越性能。这款产品不仅在实验室规模的纯化中表现出色，在工业化放大生产中也展现出了强大的稳定性和高效性。