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全能核酸酶在破解重组蛋白表达中粘稠问题的优势

2025-02-13     来源:本站     点击次数:185

在重组蛋白药物的研发与生产中,“高纯度、高活性”是核心目标。然而,宿主细胞裂解后释放的海量核酸(DNA/RNA)却成了拦路虎——它们让溶液粘如胶水,堵塞滤膜,污染层析柱,甚至影响终产物的稳定性和安全性。如何高效清除这些“隐形干扰者”? 全能核酸酶凭借其独特的“全能降解”能力,正在成为生物制药领域的明星工具!

一、宿主细胞核酸:重组蛋白生产的“甜蜜烦恼”
重组蛋白表达过程中,无论是大肠杆菌、CHO细胞还是酵母系统,裂解后都会释放大量宿主核酸:
➤ 溶液粘度飙升:核酸缠绕形成网状结构,导致过滤困难、离心耗时长;
➤ 纯化效率下降:核酸与目标蛋白竞争层析介质结合位点,降低得率;
➤ 终产品风险:残留核酸可能引发免疫原性,影响药物安全性。
传统方法(如盐析、超声破碎)效果有限,而全能核酸酶的出现,让这些问题迎刃而解!

二、全能核酸酶:核酸清除的“全能战士”
全能核酸酶是一种源自粘质沙雷氏菌的重组酶,拥有“一酶双杀”的超能力:

  • 广谱降解:无差别切割所有形式的DNA和RNA(单链、双链、线状、环状);
  • 高效作用:极低浓度(1-10 U/mL)即可快速降低溶液粘度;
  • 灵活适配:在pH 6-10、温度0-42°C范围内保持活性,兼容多种缓冲体系;
  • 安全无忧:酶自身可通过后续纯化步骤(如离子交换层析)完全去除,无残留风险。

三、四大应用场景,赋能高效生产

1、细胞裂解液澄清
添加全能核酸酶后,溶液粘度降低90%以上,显著提升离心/过滤效率,缩短工艺时间。
案例:某单抗生产中使用全能核酸酶,澄清步骤时间从8小时缩短至1.5小时,滤膜消耗成本减少60%。

2、层析柱保护者
预清除核酸可防止层析介质堵塞,延长填料寿命,提升蛋白捕获率20%-30%。

3、高纯度蛋白“护航员”
核酸去除后,目标蛋白与杂质分离更彻底,HCP(宿主细胞蛋白)残留降低,纯度可达99%以上。

4、内毒素控制
酸易吸附内毒素,清除核酸可同步降低内毒素水平,符合《中国药典》注射级蛋白标准。

从“粘稠困境”到“清澈见底”,全能核酸酶以科学之力,为重组蛋白表达开辟了一条高效、经济的纯化之路。无论是工艺开发新手还是规模化生产专家,掌握这一利器,都将让您的蛋白药物更具竞争力!

逐典生物依托重组蛋白定向改造平台,基于AI酶进化能力,成功开发多款全能核酸酶,酶活性高,终产物回收率高,能够特异性适配不同应用场景,在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,有效去除宿主残留核酸,保证生物制品功效及安全性。

产品特点

  1. 高酶活性:中、高盐缓冲液条件下,酶活性高
  2. 高回收率:高盐环境下减少核酸缠绕病毒或目的蛋白,降低AAV等病毒颗粒聚集,提高目的产物回收率
  3. 高工艺简便性:下游收获或纯化无需超滤换液或透析脱盐

性能验证数据
Pannarase全能核酸酶

图1.Pannarase全能核酸酶酶切数据

Pannarase耐高盐全能核酸酶
Pannarase在150 mM Na+浓度条件下酶活性最高,300 mM时仍有36.2%的活性

图2.Pannarase耐高盐全能核酸酶耐盐曲线

图3.Pannarase耐高盐全能核酸酶酶切数据

Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型
Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型在600~700 mM Na+浓度条件下酶活性最高

图5.Pannarase耐高盐全能核酸酶(SAN),更高盐耐受型酶切数据

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