关键词:MOG蛋白,EAE模型,糖基化
[导语] 做脱髓鞘研究绕不开EAE模型,做EAE又绕不开抗原这一步。见过不少新课题组第一次造模,方案抄得一丝不苟,却卡在抗原上:有的批次起病干脆,有的怎么打都起不来。重组人MOG蛋白(MOG 1-125胞外域)能成为这一行的默认选项,背后有三个硬理由,这篇逐个拆开。
一、截的是哪一段,为什么是这125个氨基酸
MOG是髓鞘少突胶质细胞表达的糖蛋白,胞外段是一个IgV样结构域,正是免疫识别的主战场。MOG(1-125)取的就是这段朝向细胞外的部分,对应成熟序列的Gly30至Gly154。
把跨膜段与胞内段去掉之后,蛋白更容易表达和纯化,而免疫显性表位基本保留在这段折叠里。省掉的部分不影响识别,反而让体系更干净。
二、为什么小鼠和大鼠都能用它诱导
关键在免疫显性表位。这段胞外域携带的抗原决定簇,在两种动物里都能被有效递呈,从而启动针对髓鞘的免疫攻击。
但要记住,抗原只是引信。强佐剂和百日咳毒素负责把炎症放大到可评估、可打分的程度,三者缺一,造模都容易半途而废。
三、糖基化这件事,比想象中更影响成模
同一段序列换个表达系统,表面暴露的表位可能换一张脸。HEK293表达的版本带糖链,构象更接近体内;原核版本没有糖链,折叠相对单一。做活体诱导时,构象表位是否自然暴露,往往比总产量更能决定成模率。这也是哺乳动物表达版本更受青睐的原因。
四、诱导之后,评价看哪几个读出
一般注射后一周左右开始出现尾部无力,重的会发展到后肢瘫痪,需要每天固定时段评分。你们造模后第几天开始看到症状?评分用哪个量表?评论区对一下时间线,给后来人省点试错成本。
五、产品数据与质控
该重组人MOG蛋白(MOG(1-125),UA010471)由HEK293细胞表达,带C端8×His标签,还原条件下分子量约20至23 kDa,纯度大于95%(SDS-PAGE);活性以小鼠与大鼠的EAE诱导实验验证,免疫组评分与炎症浸润均明显高于正常对照。

[图1] 重组人MOG(1-125)蛋白 EAE 诱导临床评分曲线

[图2] 重组人MOG(1-125)蛋白 SDS-PAGE 纯度检测
常见问题
Q:MOG(1-125)对应序列哪一段?
成熟MOG朝向细胞外的IgV样胞外域,全长125个氨基酸,对应Gly30至Gly154。
Q:糖基化会影响造模吗?
会,糖链影响构象表位暴露方式,哺乳动物表达更接近体内状态。
Q:换批次要注意什么?
先用小样验证造模表现再放大,规格以产品页标注为准。
选抗原看三样:区间对不对(胞外域)、系统对不对(哺乳动物表达)、活性有没有实测验证。三样都对,模型才起得稳。具体条件以产品页标注为准。
[结语]
优爱(UA BIOSCIENCE)提供重组人 MOG(1-125) 蛋白,HEK293 表达、C 端 8×His 标签,保留 MOG 免疫显性胞外域,适用于 EAE 模型诱导与脱髓鞘研究。具体纯度、活性与保存条件以产品页为准。
更多相关技术资料与产品信息,见优爱生物(UA-Bio)官网产品页。