2025 年 3 月 27 日，欧洲药品管理局（European Medicines Agency, EMA）发布了《Guideline on the quality aspects of mRNA vaccines》，该指南适用于传染病预防用 mRNA 疫苗，核心内容包括制造工艺控制、产品特性分析、质量标准制定、分析方法控制及原材料/活性成分/成品的定义等 5 个版块。

随着 EMA 新规的发布，mRNA 疫苗质控标准再度升级。指南特别强调了药物开发过程中质量控制的重要性，并以明确定义的质量目标产品概况（quality target product profile, QTPP）为指导，并从中得出关键质量属性（critical quality attributes, CQA）。以下是与药物开发相关的属性列表，明确每个属性是否被认定为 CQA，是否被界定为典型的质量属性，和/或是否被提及为需要表征的产品或工艺相关杂质：

值得注意的是，指南明确提出需要对 mRNA 疫苗的 LNP 粒径、mRNA 包封率、游离 mRNA 含量及 LNP 空壳等关键参数进行表征。

• LNP 粒径：影响 mRNA 疫苗的生物分布与递送效率
• LNP 空壳：空载 LNP 被认为是杂质，可能降低疫苗效力
• mRNA 包封率：确保 mRNA 被有效包裹及有效递送
• 游离 mRNA 残留：可能引发非预期免疫反应，需控制

传统的检测方法（如电镜、动态光散射）往往只能提供单一参数，且无法区分空载的 LNPs 与 mRNA LNP。NanoFCM（单分子纳米生物检测仪）基于其高灵敏特性，开发了 mRNA LNP 多维表征方案，恰好填补了这一领域的技术空白——仅需一台设备，即可同步完成四大核心质量指标的精准检测。

mRNA 疫苗质控的“全能选手”
NanoFCM 基于单颗粒水平检测技术，可在1分钟内完成以下关键分析：

1、粒径与浓度检测
无需标记，直接测量 LNP 的粒径分布和颗粒浓度，确保满足 EMA 要求的均一性标准。

2、空载 LNP
通过核酸染料标记，区分装载 mRNA 的 LNP（红色）与空载 LNP（蓝色），通过这一数据结果，指导工艺优化，进一步降低空载 LNP 比例，提升疫苗的纯度。

3、mRNA 拷贝数和包封率
基于 NanoFCM 对单个 mRNA 分子的高灵敏检测，在单次检测中同步识别游离 mRNA 和 mRNA LNP，通过仪器自身配套的专业分析软件即可快速获得单个 LNP 内包裹 mRNA 的拷贝数，进一步结合游离 mRNA 的定量分析即可获得包封率。

4、多组分鉴定
基于 NanoFCM 散射和荧光双触发的特性，可快速实现成功装载 mRNA 的 LNP（红色）、未装载 RNA 的 LNP 空壳（蓝色）及游离的 mRNA（橙色）等组分的快速鉴定。