近日，杭州费雪推出新品抗猪流行性腹泻病毒（PEDV）单克隆抗体，这是针对 PEDV 的特异性抗体，在猪流行性腹泻的诊断、预防及研究中具有重要作用，以下从多个方面进行详细介绍：

一、基本概念
PEDV 是引起猪流行性腹泻（Porcine Epidemic Diarrhea，PED）的病原体，属于冠状病毒科。抗 PEDV 单克隆抗体是通过杂交瘤技术制备的，能特异性识别 PEDV 表面抗原（如 S 蛋白、N 蛋白等）的单一抗体分子，具有高度特异性和均一性。

二、制备方法
抗原制备：提取 PEDV 的特异性抗原（如 S 蛋白的高免疫原性区域），或通过基因工程技术表达重组抗原（如重组 S1 亚基）。
动物免疫：将抗原免疫小鼠（通常为 Balb/c 小鼠），刺激 B 淋巴细胞产生特异性抗体。
细胞融合：取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
筛选与克隆：通过间接 ELISA 等方法筛选出能稳定分泌抗 PEDV 抗体的杂交瘤细胞，经克隆化培养获得单克隆细胞株。
抗体生产：通过小鼠腹腔注射或体外培养杂交瘤细胞，收集腹水或细胞培养上清，纯化获得单克隆抗体。

三、作用与应用
1. 诊断检测
ELISA 检测：用于检测猪血清、粪便等样本中的 PEDV 抗原或抗体，是 PEDV 感染的主要诊断方法之一。
免疫荧光（IF）与免疫组化（IHC）：通过标记抗体（如荧光素、酶标），在细胞或组织中定位 PEDV，辅助病理诊断。
胶体金试纸条：基于单克隆抗体的快速检测试纸条，可用于猪场现场的 PEDV 抗原初筛。
2. 病毒研究
病毒结构与功能研究：通过单克隆抗体识别 PEDV 的特定抗原表位，分析病毒蛋白的空间结构、抗原性及变异规律。
中和试验：筛选具有中和活性的单克隆抗体，研究其抑制病毒入侵宿主细胞的机制，为疫苗开发提供靶点。
3. 疫苗开发与评价
疫苗效力评估：检测免疫猪血清中针对 PEDV 的中和抗体水平，评估疫苗诱导的免疫应答效果。
被动免疫应用：高滴度的中和单克隆抗体可作为 “生物制剂”，用于仔猪的紧急预防或治疗（如口服或注射），尤其适用于 PEDV 爆发时的被动保护。

四、关键特性
特异性：仅识别 PEDV 的特定抗原表位，与其他猪肠道病毒（如猪传染性胃肠炎病毒 TGEV、猪德尔塔冠状病毒 PDCoV 等）无交叉反应。
中和活性：部分单克隆抗体具有中和病毒的能力，可阻断 PEDV 与宿主细胞受体的结合，抑制病毒感染。
亲和力：高亲和力的单克隆抗体与抗原结合更稳定，可提高检测灵敏度（如 ELISA 检测中最低可检测到 ng 级抗原）。
亚型覆盖：由于 PEDV 存在基因变异（如 G1、G2 亚型），优质单克隆抗体需能覆盖流行毒株的抗原表位，避免因病毒变异导致检测或保护失效。

五、应用场景与注意事项
1. 猪场诊断场景
使用场景：当猪群出现腹泻、呕吐、脱水等症状时，采集粪便或肠组织样本，用单克隆抗体 ELISA 试剂盒检测 PEDV 抗原，辅助确诊。
注意事项：粪便中的杂质可能干扰检测，需预处理样本；若样本为阳性，需结合病毒分离或 RT-PCR 进一步确认。
2. 实验室研究场景
使用场景：在细胞水平研究 PEDV 的感染机制时，用单克隆抗体标记病毒，通过流式细胞术或共聚焦显微镜观察病毒与宿主细胞的相互作用。
注意事项：不同单克隆抗体的表位不同，需根据研究目的选择针对 S 蛋白（中和相关）或 N 蛋白（检测敏感）的抗体。
3. 疫苗研发场景
使用场景：评估新型 PEDV 疫苗（如灭活苗、亚单位苗）诱导的中和抗体效价，筛选高效疫苗株。
注意事项：需参考当前猪场流行的 PEDV 毒株亚型，选择匹配的单克隆抗体进行中和试验，避免因毒株变异导致评估偏差。