细胞形态总是飘忽不定，培养数据总是无法复现，很可能是支原体正在悄悄毁掉您的实验。

01 看不见的威胁：支原体污染有多可怕
支原体是细胞培养中常见的污染物之一。据《Performance of PCR-based and Bioluminescent assays for mycoplasma detection》的报道，细胞培养中支原体的污染通常为5-35%，在某些实验室甚至高达88.7%，且往往难以察觉。因此，支原体也被称为细胞培养的“隐形杀手”。

02 为何支原体难题如此棘手
体积微小：
支原体是已知最小的原核细胞，大小通常为0.3~0.5μm。

影响严重：
一旦发生支原体污染，会导致细胞生长变缓、形态改变、代谢和基因表达异常等。

隐蔽性强：
细胞被支原体污染后，培养基通常不发生浑浊，难以及时发现。

去除困难：
由于支原体缺少细胞壁，无固定形态而呈现多形性，常规的0.2μm过滤器无法将其去除。且支原体对青霉素等抗生素天然耐药。细胞一旦被污染，全部样本只能销毁。

A. 正常培养的C3A细胞                                                    B.被支原体污染的HE-3细胞

03 支原体检测的难点
传统的支原体检测基于培养的方法，耗时久，对操作人员和实验室要求高。随着分子生物学技术的发展，PCR的方法逐步应用到支原体的快速检测中，将检测时间从28天大幅缩减至2-4小时，标准化操作可减少人为因素造成的结果偏差。

然而，利用PCR法进行支原体检测仍存在诸多难点:
支原体收集难
为提高灵敏度，在提取DNA前，需离心富集培养上清中的支原体。离心机转速不足，会导致支原体逃逸而造成假阴性风险。

DNA提取回收率低
不同种类支原体的基因拷贝数差异大，DNA提取回收率低，会影响检测结果的准确性。

气溶胶交叉污染
离心过程中，支原体气溶胶会导致样本交叉污染，造成假阳性风险。

假阴性风险高
细胞样本组分复杂，易干扰PCR反应，导致假阴性风险。

验证繁杂
根据《中国药典2025版》要求，使用PCR法进行样品检测前，需对其检测限、专属性、稳定性和耐用性进行充分验证。其中离心机的性能直接影响方法验证的可靠性。

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参考文献
[1] Priscila FL, Taliria SL, Nivea F, et al. PerformanceofPCR-basedandBioluminescentassaysfor
Mycoplasmadetection [J]. Journal of Microbiological Methods, 2015, 118 (31-36).

关于奥豪斯离心机
奥豪斯离心机源自德国Hermle品牌。Hermle创立于1938年，专注于离心机的研发和生产。其离心机以高转速和强制冷力而闻名，性能稳定，性价比高，通用性强。2022年Hermle被奥豪斯收购，与其产品线相整合，旨在为实验室客户提供一站式解决方案和服务。