科润达生物推出一步裂解法全血基因组DNA纯化试剂

2009-12-08 来源:本站点击次数:1422

一步裂解法全血基因组DNA提取试剂简介

1．本试剂盒技术指标：

· 试剂盒由单管红细胞及细胞核复合裂解液、蛋白沉淀液以及DNA溶解液组成。

· 可以同时从全血中提取人基因组DNA、线粒体DNA（mtDNA）以及病毒DNA。

· 整个提取过程不超过45分钟。

· 全血基因组提取过程包括：1裂解红细胞及有核白细胞。2盐析沉淀蛋白，分离基因组。3异丙醇沉淀脱盐并浓缩。4 70%乙醇清洗，晾干并用DNA溶解液溶解。

· 本试剂盒采用单管红细胞及细胞核复合裂解液，省去了第一代产品的裂解并去除红细胞的步骤，其中含有抑制DNA酶的成分，在加热（65°C）状态下，可保证完整的人基因组DNA、线粒体DNA（mtDNA）以及病毒DNA的充分裂解释放，异丙醇沉淀时，罕见浑浊的蛋白质杂质的共沉淀。

· 用于DNA提取的全血应为抗凝血（EDTA, 肝素或柠檬酸钠抗凝），抗凝血在-20°C存放一个月以内，避免反复冻融, 4°C存放7天以内，均能纯化出高质量的DNA。-80°C条件下，样本至少可存放2年。

· 本试剂提取的基因组DNA长度大于20kb, 可用于PCR扩增、内切酶消化以及膜杂交等。

· 试剂盒在室温下保存1年。

2. 操作流程：

DNA 溶解液溶解

200ul，70%乙醇清洗

单管全血100ul与裂解液加热（65°C）裂解20分钟

200ul蛋白沉淀液，离心沉淀

取上清，加等量异丙醇，离心沉淀，弃上清

3．一步裂解法全血基因组DNA提取试剂与promega全血基因组DNA提取试剂的比较

10个100ul，-20°C保存1周的全血样本分别用promega试剂（1、2、3号样本）以及一步裂解法全血基因组DNA提取试剂（4-10号样本）纯化的基因组DNA电泳。11号为λ/HinderIII分子量 marker。