1.离心(CENTRIFUGE) 约13,000 rpm离心30-60秒,使蛋白冻干粉集中于管底。
2.重悬(RECONSTITUTION) · 严格参照产品说明书,使用推荐的溶液将蛋白冻干粉溶解至推荐的浓度。 · 用移液枪轻吹混匀,或将管盖盖好后轻柔颠倒数次进行混匀。 · 离心数秒,以使溶液集中。
3.储存(STORAGE) · 短期储存:已重悬的蛋白溶液在4°C至多保存1周。 · 长期储存:用含一定浓度载体(0.1% BSA,5% HSA,10% FBS,或5%海藻糖(trehalose)) 的溶液或培养基稀释已重悬的蛋白溶液。分装冻存于-20至-80°C,可保存3-12个月,具体保质期请参见产品说明书。
重要提示: · 除非产品说明书中提及,否则不要在重悬蛋白时加入任何载体,如BSA(牛血清白蛋白)、 HSA(人血清白蛋白)和FBS(小牛血清)等。 · 产品说明书中有时会要求将重悬后的溶液在室温放置一段时间,请按此操作,以保证蛋白能够充分溶解。 重悬过程中禁止用涡旋器振荡! · 避免反复冻融! · 分装冻存时,蛋白浓度不可低于1μg/ml,且每管的体积不可小于10μl! |