近期，宾夕法尼亚大学的James Riley课题组和Sangamo公司共同公布了一项用于HIV治愈的I期临床试验成果，结果喜人。该研究试验利用Maxcyte GT临床级流式电转系统对HIV患者CD4 T细胞CCR5基因编辑并回输，以确定这些T细胞如何更好地实现HIV治愈策略。该结果近期已发表在The Journal of Clinical Investigation杂志上。论文标题为：CCR5-edited CD4 Tcells augment HIV-specific immunity to enable post rebound control of HIV replication.

 

研究目的：本次临床试验探讨了锌指核酸酶（ZFN）体外递送的方法，CCR5Δ32杂合子是否优先受益，CCR5基因编辑的CD4 T细胞对HIV特异性T细胞应答的影响以及注入的CCR5基因编辑T细胞在分析治疗中断期间延迟病毒反弹的能力。

研究方法：本试验采用电转与锌指核酸酶（ZFN）结合的体外传递方法，首先获取自体外周血淋巴细胞，分离并富集CD4+细胞。利用MaxCyte-GT^TM流式转染系统，在封闭系统中用ZFN-mRNAs对CD4+T细胞进行电穿染，对转染后的CD4+T细胞进行扩增。研究招募了14名HIV感染者，他们的病毒载量通过抗逆转录病毒疗法（ART）得到了很好的控制。研究测量了停药后病毒反弹的时间，CCR5编辑的CD4 T细胞的持久性以及回输100亿个CCR5基因编辑的CD4 T细胞是否增强了HIV特异性免疫反应。在完成细胞回输后，参与患者进行试验性停药。

 

研究时间线和样本采集点的示图

研究结果：这项研究发现回输CD4 T细胞耐受性良好，没有严重的不良事件。HIV功能性治愈的金标准是试验性停药后病毒反弹时间推迟。与历史对照相比，观察到病毒反弹时间略有延迟；14个人中有3个人，似乎在最终反弹之前恢复了对病毒血症的控制（其中2个为CCR5Δ32杂合子）。

值得一提的是，只有这些个体的HIV特异性CD8 T细胞反应显著恢复。在后期病毒反弹时，观察到病毒对其中一种重新激活反应的免疫逃逸，这说明病毒控制和增强的CD8 T细胞应答之间存在直接联系。

这项临床研究表明，CCR5基因编辑的CD4 T细胞回输可以通过增强已存在的HIV特异性免疫应答，来帮助实现HIV功能性治愈。

治疗中断期间病毒反弹时间

Sangamo利用MaxCyte电转平台开展多项HIV治疗研究项目
Sangamo是一家全球领先的基因治疗公司，已经与Maxcyte开展了广泛的合作，利用Maxcyte流式电转平台进行多个临床项目的研发，尤其是在HIV治疗领域。2016年Sangamo公司联合美国多所实验室利用在基因编辑中利用Maxcyte电转技术实现对CCR5基因在人体造血干细胞中的敲除，结果表明有效的双等位基因CCR5敲除效率达到72.9%，经过清洗、标记、CD34筛选以及电转后的总回收率达70%，并在临床前体内和体外实验中都表现出了CCR5基因敲除的可行性和安全性（详见参考文献2）。
 
Maxcyte利性的非病毒细胞工程平台-流式电转技术平台，为全球生物医药行业的合作伙伴赋能，帮助客户开发创新性的细胞疗法，来满足病人对先进细胞疗法的需求。利用Maxcyte ExPERT电转平台结合基因编辑手段安全高效可高度重复地对人体原代细胞进行遗传改造，在符合临床使用的严格标准前提下，用于治疗遗传性疾病和癌症。Maxcyte具有全球技术支持网络，目标是帮助合作伙伴释放它们产品的所有潜能。

Maxcyte已被全球范围内用户认可，全球前十制药公司都采用Maxcyte技术平台进行药物研发，欧美主要基因编辑和细胞治疗公司与Maxcyte合作进行新型的基因和细胞治疗产品开发，如Allogene therapeutics，Editas medicine，CRISPR Therapeutics，Precision biosciences和Kite pharma等。多个顶级学术研究机构采用Maxcyte技术研究哺乳动物细胞和干细胞， 如日本京都大学iPS细胞研究所（CIRA）和美国宾夕法尼亚大学。

[1] Pablo Tebas, Carl H. June, James L. Riley, et al. CCR5-edited CD4 T cells augment HIV-specific immunity to enable post rebound control of HIV replication[J]. J Clin Invest. 2021.
[2] Digiusto D L, Cannon P M, Holmes M C, et al. Preclinical development and qualification of ZFN-mediated CCR5 disruption in human hematopoietic stem/progenitor cells[J]. Molecular Therapy Methods & Clinical Development, 2016, 3(C):16067.