瘦肉精检测高效液相色谱法盐酸克伦特罗检测方法1
2011-03-28 来源:赛智科技 点击次数:195目前，检测瘦肉精的方法主要有四种，即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。而我国结合自己的实际情况，2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种：即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)。而HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法，其最低检测限为0.05μg/ kg，具有检测精确度高，假阳性率低的优点，被广泛使用。
赛智科技结合自身在液相色谱领域深厚的技术基础，及相关完善的产品线，推出瘦肉精的完整解决方案。
动物组织中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺残留量的检测
实验材料
固相萃取柱：SSDBX, 60 mg/3 mL (SSDBX063)
分析物：盐酸克伦特罗、莱克多巴胺
1. 提取
称取（5±0.05）g 动物肝组织样品于带盖的聚四氟乙烯离心管中，加入15 mL乙酸乙酯，再加入3 mL 10.0%碳酸钠溶液，以10 000 r/min以上的速度匀质60 s，盖上盖子以 5000 r/min 的速度离心2 min，吸取上层有机溶剂于离心管中，在 残渣中再加入10 mL 乙酸乙酯在漩涡混合器上混合1 min。离心后吸取有机溶剂并合并提取液。在收集的有机溶剂中加入5 mL 0.10 mol/mL 的盐酸溶液，漩涡混合 30 s，以5000 r/min 的速度离心2 min，吸取下层溶液，同样步骤重复萃取一次，合并两次萃取液，用 2.5 mol/L NaOH 溶液调节 pH 至5.2。
2. 净化
活化：依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水和5 mL 30 mmol/L 盐酸润洗固相萃取柱
上样：将提取液加入柱中，弃去流出液
淋洗：依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干
洗脱：6 mL 4% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液。
3. 测定
4.1 HPLC分析
色谱柱：VertexC18, 5 µm, 100 Å, 4.6×250 mm
流动相:10 mM KH2PO4(pH 3.0) : ACN = 70:30 (v/v)
流速:1.0 mL/min；温度：室温；检测器：UV 220 nm；进样体积：20 µL
检测器：安捷伦1100二极管阵列检测器
高效液相色谱仪：STI500高效液相色谱仪
色谱软件：VI2000智能色谱软件
进样器：VI-11手动进样阀、8725i手动进样阀