生物安全柜(biological safety cabinet,BSC)是一种负压净化工作台,是通过安全柜内置风机或外排风机驱动气流,产生均匀分散及单一方向的气流,对于直径>0.31xm的颗粒,通过高效空气过滤器(high efficiency particulate air filter,HEPA)过滤及 阻断。
1 生物安全柜的正确使用
1.1 在开始工作前,要让安全柜内置外排风机至少 运行3~5min,以净化安全柜内的空气。
1.2在实验操作前,操作者应该调整凳子高度,使 自己的面部在玻璃悬窗开口之上,在手臂放进安全柜内lmin后才能进行实验操作,停留的目的是为 了使安全柜稳定,并且能让气流“清扫”手套和手臂 表面的微生物染。 1.3工作台的摆放原则:在工作台面上的实验操作 应该按照从清洁区到污染区的方向进行,被污染的物品尽量不要进入干净区域,应放置在工作区域的 后部。
1.4生物安全柜前的空气幕很脆弱,极易受到干扰 而造成污染。实验中不能随意开启前窗的位置,操 作动作缓和,手臂避免频繁出入安全柜,以防止打 扰气流。因此,建议在工作开始之前准备一张实验 工作所需材料的清单,在生物安全柜内放置必要的 实验材料,这样可以减少手臂穿越气幕的次数。在安全柜工作时,开关房门、人员在房间内走动、甚至 在操作人员背后咳嗽等都会形成湍流而增加微生 物气溶胶溢出量,而造成实验室污染。
1.5明火:生物安全柜内应避免使用明火,使用明 火会对气流产生影响,并且在处理挥发性物品和易燃物品时,也易造成危险。
1.6溢出:当少量溢洒时,应在安全柜处于工作状态下立即进行清理,要使用有效的消毒剂,并在处理过程中尽可能减少气溶胶的生成。
1.7在实验结束前,将实验材料适当的处理后,让安全柜再运行5min,以完成内部的净化。
1.8清洁和消毒:工作完毕后,用漂白粉或75%酒精消毒台面和内壁,若用腐蚀性的化学剂消毒后,还应用灭菌水再擦洗。
2生物安全柜的使用和维护等方面注意事项
生物安全柜的装备,的确提高了实验室的生物安全防护,但也使一些操作人员过度依赖设备屏障的防护,而忽略了规范操作反而使其成为安全隐 患,所以在生物安全柜的使用和维护等方面需要注 意以下几个方面:
2.1 对于生物安全实验室而言,潜在的最大危害是 感染性气溶胶引起的感染,实验室在检测过程中将 不可避免产生气溶胶,应将防止气溶胶和防止已产生的气溶胶进一步扩散作为生物安全防护的重点。在处理感染性标本时,每个环节都可能产生感染性气溶胶,我们应采取以下一些安全操作来避免产生感染性气溶胶:标本容器最好用螺口旋盖;移液时不 要用力吹出移液管内最后一滴液体,不要用注射器移液;稀释菌液时,吸管针管要缓慢插入试管或烧瓶底部,小心操作避免产生气溶胶;离心时,确保样品器牢固盖紧;使用匀浆器、摇床振荡器时,最好覆 盖一个结实、透明的塑料盖;可产生气溶胶的仪器在 BSC内操作。从BSC操作要求来讲,柜内尽量避免
震动仪器的使用,例如离心机、振荡器。因为震动会 使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落,导致操作室内部洁净度降低,同时如果在前操作面平衡失败还易引起安全柜对操作者的污染。在实际操作时,离心等可在BSC外进行,但离心管的开启等操作应移至BSC内进行,这样就减少了气溶胶泄溢的危险。
2.2生物安全柜的正确安装:生物安全柜两侧、后 侧应留30cm,顶部留出足够30~34cm的空间;为减
少气流扰动,保证安全柜正常工作,生物安全柜应放置在远离实验室入口、门窗、暖气、走道,避开送风
口,避免外界气流对柜内气流造成扰动。
2.3生物安全柜投入使用后,其管理是一项重要的工作,也是一项薄弱的环节,由于设备人员、实验人责任界限不清,疏于管理,给实验室安全带来极大隐 患,必须建立科学的管理制度,严格执行,责任落实到人,并进行监督,确保实验室安全。