一、原代肝细胞转染siRNA简述

小干扰RNA转染，将原代肝细胞接种到6孔板或96孔板的含10% FBS Eagle培养基中,培养二十四几小时后，用100 nM的CHOP siRNA 或100 nM 阴性对照 siRNA (siNC) 使用美国Zeta Life公司Advanced DNA RNA转染试剂转染原代肝细胞（货号：AD600050，Zeta life，United

States）。 以下CHOP siRNA序列用于转5'-CAGUAUCUUGAGUCUAAUATT-3'和 5'-UAUUAGACUCAAGAUACUGTT-3' , 转染 24 h 后，将肝细胞放置于300 μM MCT 36 h，然后对细胞活力、Annexin-V/PI 染色或蛋白质印迹测定。

培养条件：选择美国Zeta Life公司胎牛血清（＃z7181FBS-500）对原代肝细胞培养，并完成后期培养实验。

二、Small Interfering RNA Transfection 原文分享

Hepatocytes were seeded into 6-well plates or 96-well plates in Dulbecco’s Modifified Eagle Medium with 10% FBS. Twenty-four hours later, they were transfected with 100 nM of CHOP siRNA or 100 nM of negative control siRNA (siNC) using Advanced Transfection Reagent (Catalog No.: AD600050, Zeta life, United States) according to the manufacture’s protocol. The followingCHOP siRNA sequences were used for transfection: 5′-CAG

UAUCUUGAGUCUAAUATT-3′ (sense) and 5′-UAUUAG ACUCAAGAUACUGTT-3′ (antisense) After 24 h transfection, hepatocytes were exposed to 300 μM of MCT for another 36 h, followed by the cell viability assay, Annexin-V/PI staining, or western blotting

三、公司介绍

上海转染生物科技有限公司是服务于高校和科研院所生命科学基础研究、生物医药研发、细胞生物学产业化等相关领域的高科技生物技术企业。我们服务于生命科学研究、活体动物转染、大规模生物制品生产、基因和细胞治疗领域等客户。提供的第三代细胞内可代谢的ZetaLife AdvancedDNA\RNA转染试剂，解决了部分细胞转染效率低、脂质体转染毒性大、需要无血清环境的这些问题；提供的in vivo Advanced活体动物体内转染试剂可以通过静脉注射或体内局部组织注射的方式完成转染过程; 提供的inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清D 细胞培养规模生产支持；提供以植物生物为平台基因序列100％人源化、细胞培养可分解的3D基质胶产品；提供内毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品等。

美国Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂，此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

四、ZetaLife Advanced DNA/RNA Transfection Reagent优秀特点：

1、转染效率高：新型高分子材料载量大、体积大小是脂质体的1/10、进入细胞能力强

2、无细胞毒性：进入细胞后可以被代谢成水和二氧化碳的转染试剂

3、不激活细胞表面或细胞体内marker，不激活细胞免疫机制

4、对细胞膜无物理性损伤，不易出现细胞变形、利于细胞保持较高活力

5、可反映真实的细胞通路蛋白原始数据

6、操作简单：含血清完全培养基转染、无需4-6h换无需购买无血清培养

7、可高效率转染siRNA到任何干细胞、免疫细胞、原代细胞、悬浮细胞及细胞系