使用第三代高分子材料转染试剂，美国ZetaLife Advanced Transfection Reagent。

一、转染步骤：

1、质粒提取：使用无内毒素提取试剂盒

2、质粒溶解：溶于超纯水或双蒸水，不能溶于试剂盒Buffer等其他试剂

3、质粒荧光：若质粒不带荧光、请使用荧光对照，方便查看转染效率

4、质粒浓度：500-600ng/ul

5、质粒和转染试剂复合物制备：质粒8ug和转染试剂8ul，吹打混匀室温静置15分钟，无需也不能另外加入任何试剂稀释

6、细胞转染前状态：拍照片留存

7、贴壁细胞铺板：6孔板完全培养基2ml、培养基中不加双抗，细胞密度：60%左右

8、转染：将复合物加入轻摇混匀、培养箱培养

9、换液：转染24小时后培养基换液

10、转染效率：转染48小时后拍荧光照片，查看转染效率

11、转染后细胞状态：拍明场细胞状态照片

12、检测：总计转染48小时后提取RNA或蛋白检测

三、ZetaLife Advanced DNA/RNA Transfection Reagent优秀特点：

1、转染效率高：新型高分子材料载量大、体积大小是脂质体的1/10、进入细胞能力强

2、无细胞毒性：进入细胞后可以被代谢成水和二氧化碳的转染试剂

3、不激活细胞表面或细胞体内marker，不激活细胞免疫机制

4、对细胞膜无物理性损伤，不易出现细胞变形、利于细胞保持较高活力

5、可反映真实的细胞通路蛋白原始数据

6、操作简单：含血清完全培养基转染、无需4-6h换无需购买无血清培养

7、可高效率转染siRNA到任何干细胞、免疫细胞、原代细胞、悬浮细胞及细胞系.