禽畜肉、内脏中大环内酯类兽残检测方案-QuE-UPLC-MS/MS法

2022-07-28 来源:逗点生物官方微信公众号点击次数:1872

大环内酯类化合物是从链霉菌培养液中分离出来的一类抗生素，由于对革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌和支原体都有很强的抗菌活性，被用作预防疾病和促进生长的饲料添加剂，广泛应用于禽畜生产中。

本方法以QuEChERS为净化手段，选择鸡肉、猪肉和猪肝为代表，对禽肉、畜肉和动物内脏三种类型的基质做了三个不同水平加标验证，回收率满足70%~106%，RSD＜10%，符合使用要求，可供客户选择。

一、样品提取

Copure®兽残专用QuEChERS提取管

准确称取粉碎均匀的肉类样品2 g于干净离心管中（货号：COQ050051），加入2 mL 水，涡旋1 min，加入10 mL 1%乙酸乙腈溶液，涡旋1 min，加入Copure® 兽残专用QuEChERS盐包，涡旋混匀后超声提取10 min，5000 r/min离心2 min，待净化。

Copure® 兽残专用QuEChERS套装

二、样品净化

Copure® 兽残专用QuEChERS净化管

取6 mL上清液于Copure® 兽残专用QuEChERS净化管，2500 r/min涡旋2 min，8000 r/min离心5 min，取上清液5 mL，氮吹近干后用0.1%甲酸水：甲醇=9:1溶液定容至1 mL，上机。

净化管货号：COQ015604

三、基质标准曲线溶液的制备

选同类型空白肉类样品，按上述前处理方法进行操作，取净化后的上清液加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L的标准曲线。

四、仪器条件

【色谱条件】

仪器：UPLC-MS/MS

Thermo Fisher TSQ Endura

色谱柱：Commasil® 兽残专用柱 BEH T-C18

2.1 mm×100 mm，3 μm

流动相：A：水（0.1 %甲酸） B：甲醇

洗脱方式：梯度洗脱，见表1

流速：0.3 mL/min

柱温：35℃

进样量：10 μL

表1 梯度洗脱程序