冷冻是冷冻干燥过程的基础。高效冷冻干燥过程生产需要一种稳健的冷冻方法来。
产品被放在袋子、托盘、培养皿、试管或其他容器中,以便在冷冻干燥过程中进行处理。也可以放置在冷冻干燥机的冻干支架上,通过控制的温度变化速率降低架子温度以受控的方式冷冻产品。有些产品是通过浸泡冷冻的在LN2中,这会导致小的晶体结构,因此建议在将材料放入冷冻干燥机后考虑退火步骤。
某些情况下,可以将产品放入-80摄氏度的冰箱中冷冻,并储存一段时间,直到准备好进行处理。在低温冷冻柜中冷冻时,应注意确保产品以提供一致冷冻的方式始终放置在冷冻柜中整个批次。因此,应避免将材料堆叠在一起,并在样品之间留出空间,以允许对流空气流动。将产品放入冰箱时,冰箱的温度应始终相同,防止袋子或托盘相互接触的支架将提供一致的条件,从而使所有材料的冷冻动力学相同。
冷冻的最终温度需要在-40℃以下,由于产品的玻璃化温度,应在-60℃~ -80℃。有人认为牛心包的玻璃化转变温度低于-80℃,临界温度为-11.6℃,应进行退火处理在-20℃下进行1至3小时。
重要提示: 如果在降低腔室压力之前产品未完全冷冻,则产品中未冷冻的溶剂可能会起泡并破坏结构。
冷冻的方法和速度产生非常不同的冰晶结构。例如,快速冷冻(> 10 ℃/分钟)导致小冰晶结构,其会阻碍初级干燥阶段的升华,而慢速冷冻(1 ℃/分钟或更慢)导致升华的大冰晶结构友好。对于某些产品,冷冻的初始速度需要很快,以保持pH值,消除产品沉淀,或防止细胞因冰晶生长缓慢而受损。在这些情况下,增加退火步骤以使晶体尺寸增大,这使得升华蒸汽更容易脱离冻结结构。专家建议,缓慢冷冻或缓慢冷冻结合退火导致冷冻干燥后最低的残留水分含量。
研究冷冻速率和冷冻方法对产品的影响将有助于更好地了解如何进一步改进冷冻方法。
摘要:
-冷冻是冷冻干燥的基础
-冷冻应一致且可重复
产品应以相同的方式放置在冰箱中,以确保持续冻结。
-过程控制和验证对于成功和一致的冷冻干燥至关重要过程
-快速冷冻会产生小冰晶,从而导致初级干燥速度减慢。
然而,组织可能需要快速冷冻以消除细胞损伤。
-在产品玻璃化转变温度以下冻结
-添加退火以改善晶体结构和一致性
重要提示: 如果在降低腔室压力之前产品未完全冷冻,则产品中未冷冻的溶剂可能会起泡并破坏结构。
冷冻的方法和速度产生非常不同的冰晶结构。例如,快速冷冻(> 10 ℃/分钟)导致小冰晶结构,其会阻碍初级干燥阶段的升华,而慢速冷冻(1 ℃/分钟或更慢)导致升华的大冰晶结构友好。对于某些产品,冷冻的初始速度需要很快,以保持pH值,消除产品沉淀,或防止细胞因冰晶生长缓慢而受损。在这些情况下,增加退火步骤以使晶体尺寸增大,这使得升华蒸汽更容易脱离冻结结构。专家建议,缓慢冷冻或缓慢冷冻结合退火导致冷冻干燥后最低的残留水分含量。
研究冷冻速率和冷冻方法对产品的影响将有助于更好地了解如何进一步改进冷冻方法。
摘要:
-冷冻是冷冻干燥的基础
-冷冻应一致且可重复
产品应以相同的方式放置在冰箱中,以确保持续冻结。
-过程控制和验证对于成功和一致的冷冻干燥至关重要过程
-快速冷冻会产生小冰晶,从而导致初级干燥速度减慢。
然而,组织可能需要快速冷冻以消除细胞损伤。
-在产品玻璃化转变温度以下冻结
-添加退火以改善晶体结构和一致性
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冻干曲线