NCI-H1299、RAW 264.7、293T-ACE2等细胞的完全培养基配置与传代步骤
2023-08-07 来源:本站 点击次数:2470美森产品频登各大期刊
近年，随着美森细胞的产品种类越来越丰富，产品质量也是频频收获业内人士的称赞，许多学者都会采购美森的产品进行实验后，在各大期刊上发表论文，均取得了不错的成绩，美森深感荣幸。
让我们一起看看是哪些产品收获了学者们的芳心~
01 NCI-H1299
原文链接：
https://biologicalproceduresonline.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12575-023-00192-4
细胞展示
完全培养基配制
该细胞系培养所用基本培养基为RPMI1640 Medium,配置完全培养基时需加入10%FBS，1% Anti-Anti。
传代步骤
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基, 加入PBS清洗一次。
2. 加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm²培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200xg/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:2 至 1:4（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
02 RAW 264.7
原文链接：
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7917392/
细胞展示
完全培养基配制
传代步骤
2. 用细胞刮铲使细胞从培养板底部脱落。
3. 吹打使细胞分散，然后转移到新的培养板中。
传代比例：建议 1:3至 1:4（以培养瓶底面积计算）。
培养基换液: 每隔2至 3天。
03 293T-ACE2
原文链接：
https://www.nature.com/articles/s41421-022-00517-9
细胞展示
完全培养基配制
2. 加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm²培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200xg/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:2 至 1:4（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
注意：该细胞插入人源ACE2基因，且具有Puro抗性。
原文链接：
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fgene.2022.817552/full
细胞展示
完全培养基配制
注意：请勿过滤完全培养基。
2. 加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm²培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200xg/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:2 至 1:4（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
注意：培养板需预先进行包被24小时（包被液组分为 ：0.01mg/ml fibronectin, 0.03 mg/ml bovine collagen type I and 0.01 mg/ml bovine serum albumin dissolved in culture medium.
原文链接：
https://www.karger.com/Article/FullText/525563
细胞展示
完全培养基配制
该细胞系培养所用基本培养基为DMEM/F12 Medium，配置完全培养基时需加入10%FBS，1% Anti-Anti。
传代步骤
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基, 加入PBS清洗一次。
2. 加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm²培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200xg/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:2 至 1:4（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。