细胞简介

图片来源：ATCC

推荐培养体系：

DMEM 【VivaCell C3113】＋ 10% FBS 【VivaCell C04002】＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】

细胞培养步骤 

待细胞融合度约70%时即可进行传代。

以T25培养瓶为例：

1. 吸出原培养液；加入2ml左右PBS【VivaCell C3580】，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；

2. 加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液【VivaCell C3530】，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞后放入培养箱消化约3 min，显微镜下观察多半呈流沙状，终止消化；（全程不要拍打培养瓶）

3. 离心，300g、3min，离心完吸出上清丢弃；

4. 加入新鲜培养基，将细胞吹到成单个，经计数，均匀接种到新培养瓶中，补足培养基至5ml，放培养箱进行培养。

细胞诱导分化  

由于C2C12细胞分化很快，对于研究对理解肌肉细胞发育和修复（再生）是非常重要的。低浓度的马血清能够有效刺激C2C12成肌细胞向成熟细胞分化。

我们在这里也简单介绍下诱导分化的相关知识：

01

  诱导体系： 

DMEM 【VivaCell C3113】＋ 马血清 【VivaCell C2510】（常见比例为2%）＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】

02

  简述细胞诱导步骤： 

待细胞生长至融合度约过80%时。

1. 用PBS【VivaCell C3580】润洗细胞后吸出PBS丢弃；

2. 换诱导分化培养基，后续每24h换液一次，在显微镜下观察细胞形态和生长状况。

03

  诱导时刻关键步骤： 

• 诱导前提：低代次，细胞状态很好的C2C12细胞

• 融合时间：在其融合率刚过80%，换含有马血清（一般是2%比例）完全培养液。之后需要每天进行换液

• 诱导时间：正常7天内可成功

• 提示：诱导的期间会有不少的死亡细胞，也有又成肌细胞的缓慢生长，是正常的

• 成功的标志：最后可以看见肌管，表现为厚的管状结构，有时为多核

图片来源：网络，侵删
 
 

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