最初，3T3细胞系是由George Todaro和Howard Green在1962年构建的永生化细胞系，来自小鼠胚胎的成纤维细胞。这些细胞在低密度条件下培养，可以持续分裂并增殖。小鼠胚胎成纤维细胞系是通过克隆分离得到的3T3（Swiss小白鼠）的连续亚株，通过特定的培养条件和诱导因子（如胰岛素、地塞米松和异丁基甲基黄嘌呤等）诱导3T3-L1细胞分化为成熟的脂肪细胞。这个特性使得3T3-L1细胞系成为研究脂肪细胞生物学的重要模型，广泛应用于研究脂肪细胞的分化、代谢及相关疾病（如糖尿病、肥胖症）。
    在体内，3T3-L1前体细胞通过特定的信号刺激（如胰岛素、类固醇和其他代谢因子）被诱导分化为脂肪细胞。可以利用3T3-L1研究脂肪合成相关基因如脂肪酸合成酶（FAS）、甘油三酯合成酶（DGAT）C/EBPα和PPARγ，这些基因是脂肪细胞分化的重要转录因子， 使用CRISPR/Cas9等基因编辑技术，可以研究特定基因在脂肪细胞功能和代谢中的作用。
研究者可以利用3T3-L1分化成脂肪细胞评估新药对脂肪生成、脂肪代谢和胰岛素敏感的影响，通常诱导3T3-L1的分化成脂肪细胞的方式是鸡尾酒诱导法。  
*鸡尾酒诱导法实验方案材料准备：

• 细胞株：3T3-L1细胞
• 培养基：
  • DMEM（高糖型）
  • 胎牛血清（FBS）
  • 青霉素-链霉素（Penicillin-Streptomycin）
• 诱导液：
  • Dexamethasone（1 µM）
  • Insulin（10 µg/mL）
  • 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX)（0.5 mM）
• 培养器具：培养瓶、培养皿

实验步骤

• 细胞培养：
  • 将3T3-L1细胞在DMEM培养基中，添加10% FBS和1%青霉素-链霉素，在37°C、5% CO₂的条件下培养。
• 细胞接种：
  • 当细胞融合度达到约80%时，用胰蛋白酶消化细胞，离心后重新悬浮于培养基中。
  • 接种于培养皿中，继续培养至细胞密度达到约100%（接种后约2-3天）。
• 诱导分化：
  • 在细胞达到完全融合后，换成诱导液（包含Dexamethasone、Insulin和IBMX），在37°C培养48小时。
• 维持培养：
  • 诱导后48小时，换成含有Insulin（10 µg/mL）的培养基，继续培养2-3天。
• 后续培养：
  • 每隔几天更换培养基，直到细胞完全分化（一般需要7-10天）。
• 分化观察：
  • 通过油红O染色等方法观察细胞内脂肪滴的形成。

• 注意事项
  • 诱导液的成分和浓度可能需要根据实验需求进行优化。
  • 确保无菌操作，避免细胞污染。
  • 定期观察细胞状态，确保细胞健康。

3T3-L1细胞形态特点：
    3T3-L1细胞是一种小鼠前脂肪细胞系，其形态特征包括扁平或多边形的细胞形状，细胞较大且通常呈现聚集或连片生长的状态。在诱导分化后，细胞会变得更圆，并开始形成脂滴。 
3T3-L1形态图
    为了更深入地了解3T3-L1细胞的行为和特性，使用康和达全自动活细胞成像仪 Celloger^® Pro 进行实时拍摄。这款设备结合了传统显微镜的光学技术、先进的数字成像技术和软件自动化技术，为成骨细胞的研究提供了前所未有的便利。

3T3-L1 (Fibroblasts(Mouse))
Morphology	Fibroblast
Culture Properties	Adherent

临床意义
    3T3-L1细胞在研究多种与代谢相关疾病（如肥胖、糖尿病和心血管疾病）方面发挥了重要作用。以下是一些关键点：

• 肥胖：3T3-L1细胞分化为脂肪细胞的过程帮助研究脂肪组织如何影响全身代谢，以及如何通过调节脂肪细胞功能来预防和治疗肥胖。
• 2型糖尿病：通过观察3T3-L1细胞对胰岛素的反应，研究人员可以了解胰岛素抵抗的机制，进而探索改善胰岛素敏感性的方法。
• 炎症：3T3-L1细胞能够研究肥胖相关的慢性炎症，因为肥胖会导致脂肪组织中的炎症因子释放，这与代谢综合症密切相关。
• 脂肪代谢异常：3T3-L1细胞还用于研究脂肪酸氧化、脂肪合成等代谢途径的调控，帮助理解代谢异常如何影响健康。
• 药物筛选：通过3T3-L1细胞模型，可以筛选和评估新药物对脂肪细胞功能和代谢的影响，为新疗法的开发提供基础。

 
活细胞成像仪：洞察生命的微观世界
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完美结合：开启药物筛选的新篇章
    在利用Celloger活细胞成像仪，可以被用来观察3T3-L1细胞在不同条件下的生理变化，比如脂肪滴的形成、3T3-L1细胞增殖、凋亡等，利用Celloger活细胞成像仪，评估新药对糖尿病或者脂肪类疾病的影响，让药物筛选更加精准。
    因此，我们诚挚邀请广大科研人员加入我们的行列，共同探索药物筛选的新方式，利用活细胞成像仪的强大功能，开启药物筛选的新篇章。让我们携手并进，在药物筛选的征途中，创造更加辉煌的明天！
 
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• 荧光和明场镜头

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Celloger^® Pro为用户提供可更换的物镜，为研究人员的不同需求提供灵活性。有2X，4X和10X的物镜供选择，用户可以自由切换。

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Celloger^® Pro 适配多种holder以适用多种不同类型的细胞培养容器，包括孔板、T形瓶、载玻片。

• Celloger^® Pro 应用场景

来源：
Teixeira C, Sousa AP, Santos I, Rocha AC, Alencastre I, Pereira AC, Martins-Mendes D, Barata P, Baylina P, Fernandes R. Enhanced 3T3-L1 Differentiation into Adipocytes by Pioglitazone Pharmacological Activation of Peroxisome Proliferator Activated Receptor-Gamma (PPAR-γ). Biology (Basel). 2022 May 24;11(6):806. doi: 10.3390/biology11060806. PMID: 35741327; PMCID: PMC9219682.