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LV PRO在重塑非病毒大体积T细胞工程化流程中的优势

2025-08-01     来源:本站     点击次数:18

在细胞与基因治疗(CGT)迈向产业化的今天,如何在不依赖病毒载体的前提下,高效递送复杂构建体,成为工艺开发中的关键挑战。Lonza最新发布的4D-Nucleofector® LV PRO模块,正是为此而生。

非病毒递送的“放大难题”

正在被解决

传统电转系统在小体积(如20μL或100μL)下表现良好,但一旦放大至临床所需的10亿级T细胞,效率、活性和一致性往往难以维持。LV PRO通过两种全新耗材——2mL固定体积加样盒(FV)与20mL流通式加样盒(FT),实现了从微量到大体积的无缝扩展。

关键数据

在20μg/mL mRNA或12μg/mL质粒DNA条件下,LV PRO在2mL和20mL体积中均实现了与100μL参考组相当的转染效率(GFP+细胞比例)

细胞活性在转染后24小时仍保持>90%

CRISPR编辑:

效率与一致性的双重突破

在多个供体的实验中,LV PRO在CRISPR敲除(TRAC KO)与敲入(RAB11A-GFP KI)中均展现出卓越性能:

敲入效率:在7位供体、13组实验中,LV PRO的敲入效率与100μL参考组一致,且在不同电转程序下均表现稳定

一致性:20mL流通式加样盒在13个连续循环中,敲入效率与回收体积波动极小,表明系统具备高度工艺稳定性

从电转到扩增:

完整的细胞工程流程验证

在G-Rex®生物反应器中,LV PRO转染后的T细胞可实现53–70倍扩增,最终获得超过4亿个活细胞,验证了其在下游培养中的兼容性与可扩展性。

适配多种构建体与起始材料

无论是3.5kb还是1.4kb的HDR模板,LV PRO均可高效递送;同时支持不同来源的T细胞(PBMC、CD3+,激活或静息状态),为工艺开发提供更大灵活性。

总结

LV PRO,不只是“放大”,更是“复制”

Lonza的LV PRO模块不仅解决了非病毒递送在大体积下的效率瓶颈,更通过一致性、灵活性与可扩展性,为CGT制造流程提供了真正可复制的解决方案。

上海玮驰仪器有限公司Lonza为代理商

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