
乳清蛋白约占牛奶中所有蛋白质的 20%,是乳制品行业中的一种重要副产物。它不仅营养丰富,更因其易于吸收的特性而备受青睐。乳清蛋白水解物(WPH)则是在酶解技术的“精准剪裁”下,将大分子蛋白分解成更易吸收的小肽和氨基酸,吸收速度更快、生物利用度更高!凭借出色的消化特性和多种潜在生理功能,WPH已成为运动营养、临床支持和功能性食品领域的“明星成分”。
酶促水解
•在250 ml反应器中,用4N NaOH将WPC80调至pH 7,温度升至50°C后加入酶,维持250 rpm搅拌2小时,随后在90°C下加热10min使酶失活。灭活后,将蛋白水解物冷却至室温,然后于-80℃下冷冻,随后冻干以获得粉末状水解物以进行进一步实验。
水解度测定
•使用10 kDa超滤离心管在FC5515R离心机中,以10000 rpm,4℃下离心10分钟,对透析液中水解肽的浓度进行测定,以计算水解度(DH)。
线虫处理
•将不同浓度的WPH(250, 300, 350 和 400 μg/mL)施加于含0.5 μg/mL尼罗红染料的线虫生长培养基(NGM)平板上,观察其对线虫脂肪含量、甘油三酯和胆固醇的影响。
抗氧化活性评价
•评估在H2O2 (2 mM)诱导的氧化压力下,不同浓度的WPH对线虫生存率的影响。
神经保护实验
•在转基因C. elegans CL4176中诱导Aβ肽的表达,以研究WPH的神经保护作用。
•甘油三酯含量:
与对照组相比,在WPH处理下,线虫的甘油三酯降低了29.3%(p < 0.05),显示出类似于与阳性对照奥利司他的效果。
•胆固醇吸收:
WPH显著降低了线虫的胆固醇含量(p < 0.01),这一效果与阳性对照依折麦布相当。
•抗氧化活性:
WPH在250 μg/mL浓度下使线虫在氧化压力下的存活率相比对照组提高了27%(p < 0.0001)。
•神经保护效果:
所有剂量均具有显著保护效果(p<0.0001)。在400 μg/mL的WPH处理下,诱导30小时,未麻痹的线虫比例 47.1% 。
通过实验发现,新型酶解乳清蛋白水解物在调节脂质、抗氧化甚至神经保护方面,都展现出了令人惊喜的潜力!而这一切的背后,离不开奥豪斯FC5515R离心机的稳定支持——凭借精准的温控与高效的离心表现,它在超滤步骤中顺利区分出不同分子量的活性肽段,既保障了水解度测定的准确性,也最大程度保留了样品的生物活性。
我们很高兴FC5515R能助力科研团队取得可靠发现。为科学研究提供稳定、可靠的工具,是奥豪斯始终如一的承诺。期待未来能陪伴更多研究者,共同探索大健康领域的无限可能。
参考文献
Néstor David Giraldo, Juan David Sánchez, Andrés López, Nuria González, Ferran Balaguer, Jennifer Redondo, Silvia Llopis, Marta Barrena, Bernadette Klotz,
Functional assessment of a whey protein hydrolysate: In vivo responses in lipid regulation, oxidant defense, and neural protection in Caenorhabditis elegans,
International Dairy Journal, Volume 154, 2024, 105921, ISSN 0958-6946,
https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2024.105921.