生物实验室的仪器设备操作及防护规范是保障实验安全、避免人员伤害和环境污染的核心准则。以下从仪器设备操作规范和防护规范两方面详细说明：
 
一、仪器设备操作规范
 
生物实验室仪器种类繁多，需根据其功能和风险等级制定针对性操作流程，核心原则是“先培训后操作、按规程执行、定期维护”。
 
（一）基础通用仪器操作规范
 
适用于移液器、离心机、培养箱、水浴锅等基础设备。
 
1、移液器
 
操作前检查量程是否匹配实验需求，避免超量程使用（可能导致刻度损坏或液体倒流）。
 
吸液时缓慢松开按钮，避免液体吸入移液器内部（污染机芯）；放液时贴壁缓慢推出，确保液体完全转移。
 
使用后立即归位，定期（每 3-6 个月）校准，避免因精度误差影响实验结果。
 
接触生物样本或化学品后，需用 75% 酒精擦拭移液器外表面消毒。
 
2、离心机
 
离心前必须平衡样品：对称放置的离心管重量差≤0.1g，避免离心时产生剧烈震动损坏仪器或导致样品泄漏。
 
选择合适的离心转头和转速：转头需匹配离心机型号，转速不可超过转头最大耐受值（查看转头标签）。
 
启动前确认盖子扣紧，运行中禁止打开盖子或触碰离心机；结束后待转头完全停止（转速显示为 0）再打开，避免样本飞溅。
 
离心含生物危害样本（如病原体）时，需使用密封离心管和防漏转头，操作后对转头和腔室用含氯消毒剂擦拭消毒。
 
3、培养箱
 
启动前检查温度、湿度（如 CO₂培养箱需检查 CO₂浓度）是否符合设定值，定期（每周）用 75% 酒精擦拭内壁，避免霉菌或细菌污染。
 
放置培养皿 / 瓶时避免堆叠过密，保证气流循环；取出样本后及时关闭门，减少温度波动。
 
长期不用时，清空内部物品，断电并保持干燥，防止内部部件锈蚀。
 
4、水浴锅
 
加水至水位线以上（避免干烧损坏加热管），使用去离子水或蒸馏水（减少水垢）。
 
设定温度后等待稳定（通常 ±0.5℃）再放入样品，避免直接接触加热管（防止局部过热导致样品变性）。
 
实验结束后关闭电源，倒出余水并清洁内壁，定期（每月）用柠檬酸溶液去除水垢。
 
（二）高风险仪器操作规范
 
包括生物安全柜、高压蒸汽灭菌器、PCR 仪等，需严格遵循“屏障防护”和“消毒灭菌”原则。
 
1、生物安全柜（BSC）
 
操作前：开启风机 3-5 分钟，紫外消毒 30 分钟（确保无人员暴露），检查气流指示灯（正常为绿色）。
 
操作中：手臂缓慢进出，避免快速移动破坏气流；样本和试剂放置在工作台中央（远离出风口）；禁止在柜内书写或放置无关物品。
 
操作后：关闭紫外，开启风机 30 分钟；用 75% 酒精擦拭台面、侧壁及玻璃门；记录使用时间和消毒情况。
 
注：不同等级 BSC（Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ 级）适用场景不同，Ⅱ 级最常用，需定期（每年）检测气流速度和密封性。
 
2、高压蒸汽灭菌器
 
装载：物品体积不超过灭菌器容积的 80%，玻璃器皿瓶口朝上（避免液体溢出），灭菌袋留有缝隙（便于蒸汽穿透）。
 
运行：根据物品类型设置参数（如生物废弃物 121℃、30 分钟，敷料 132℃、4 分钟）；排气阶段需缓慢放气（避免液体暴沸）。
 
结束：待压力降至 0MPa、温度＜80℃时再打开舱门；取出物品时戴隔热手套，避免烫伤；定期（每月）用生物指示剂（如嗜热脂肪芽孢杆菌）验证灭菌效果。
 
3、PCR 仪
 
操作前：用 75% 酒精清洁样品槽（避免核酸污染），检查加热模块是否平整（防止样品管接触不良）。
 
加样：在生物安全柜内进行，避免气溶胶污染；样品管盖紧，离心后放入仪器（防止液体挂壁）。
 
运行：设置程序后确认无误再启动，避免中途开盖；结束后立即取出样品，或 4℃保存（防止产物降解）。
 
二、防护规范
 
防护需构建“个人 - 环境 - 应急”三级屏障，降低生物危害（如病原体、毒素）、化学危害（如消毒剂、试剂）和物理危害（如烫伤、刺伤）风险。
 
（一）个人防护装备（PPE）
 
根据实验风险等级（生物安全等级 1-4 级，BSL-1 至 BSL-4）选择，最低要求如下：
 
1、基础防护（BSL-1/2）：
 
实验室外套：长袖、防水材质，袖口收紧（避免袖口接触样品）；
 
手套：一次性丁腈或乳胶手套（接触生物样本必戴，每操作 1 小时或污染后立即更换）；
 
护目镜 / 面罩：在移液、离心、消毒等可能产生飞溅的操作中佩戴；
 
鞋套：进入 BSL-2 及以上实验室需穿，避免鞋底污染。
 
2、高级防护（BSL-3/4）：
 
额外配备正压防护服（BSL-4）、呼吸防护器、专用防护靴等，需经专业培训后使用。
 
（二）实验室环境防护
 
1、分区管理：
 
明确划分清洁区（办公区、试剂准备区）、半污染区（实验操作区）、污染区（样本处理区、废弃物暂存区），各区物品不可交叉使用。
 
污染区设置生物危害标识（⚠️），限制无关人员进入。
 
2、清洁与消毒：
 
台面：每日实验结束后用 75% 酒精或 1000mg/L 含氯消毒剂擦拭；
 
仪器表面：离心机、生物安全柜等使用后立即消毒；
 
地面：每周用含氯消毒剂拖地 1-2 次，有泄漏时立即处理。
 
注：不同污染物需选对应消毒剂（如病毒用含氯消毒剂，细菌用酒精）。
 
3、废弃物处理：
 
生物废弃物：放入红色专用高压袋，灭菌后交由专业机构处理；
 
锐器（针头、刀片）：放入防刺穿锐器盒，满 3/4 时密封处理；
 
化学废弃物：分类倒入对应试剂回收桶（如酸、碱、有机溶剂分开），禁止混合。
 
（三）应急处理
 
1、生物暴露（如皮肤接触病原体、针刺伤）：
 
针刺伤：立即挤压伤口挤出少量血液，用肥皂水冲洗 5 分钟，再用 75% 酒精消毒，报告实验室负责人并记录暴露源，必要时就医（如接种疫苗）。
 
皮肤接触：用肥皂水冲洗 15 分钟，若有伤口需扩大冲洗范围，消毒后就医。
 
2、化学灼伤（如接触强酸、强碱）：
 
酸灼伤：立即用大量清水冲洗，再用 5% 碳酸氢钠溶液中和；
 
碱灼伤：用大量清水冲洗，再用 2% 硼酸溶液中和；
 
处理后及时就医，保留致伤化学品信息。
 
3、泄漏处理：
 
少量泄漏（如试管打碎）：戴手套和护目镜，用吸水纸覆盖，倒上消毒剂（如含氯消毒剂）静置 30 分钟，再清理碎片（放入锐器盒），消毒台面。
 
大量泄漏（如生物安全柜内样本溢出）：撤离人员，关闭通风，30 分钟后穿防护服进入，用消毒凝胶覆盖泄漏区域，按上述步骤处理，报告负责人。
 
三、核心原则总结
 
“不熟不操作”：任何仪器必须经培训合格后使用，禁止擅自操作。
 
“防护优先”：实验前检查 PPE 是否完好，环境是否符合安全要求。
 
“及时记录”：仪器使用、消毒、故障及暴露事件需详细记录，便于追溯。
 
遵循以上规范可最大限度降低实验室风险，保障实验人员安全和实验结果可靠性。