小鼠ELISA的保存和使用操作关键步骤
2026-01-06 来源:本站 点击次数:89
小鼠ELISA试剂盒是一种用于检测特定蛋白质或分子的高灵敏度实验工具,广泛应用于科研领域。为了确保实验结果的准确性,必须严格按照说明进行保存和操作。
使用前准备:
1、回温与平衡
试剂盒需室温(22-27℃)平衡15-30分钟后再使用,避免直接开封酶标板包装。
浓缩洗涤液若有结晶析出,可水浴加热助溶。
2、样本处理
血清/血浆:室温静置后离心(2000-3000转/分),上清分装保存,避免反复冻融。
细胞上清:离心去除颗粒,分装后-20℃保存。
使用注意事项:
1、所有试剂应充分混匀,避免泡沫;
2、加样顺序和时间要一致,确保反应时间相同;
3、洗板要彻底,防止残留影响结果;
4、底物A和B应避免长时间暴露,底物A对光敏感;
5、实验完成后应立即读取OD值,避免颜色变化影响准确性。

保存条件:
1、未开封的试剂盒:按照试剂瓶标签所示保存所有试剂,确保标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2、开封后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,酶标板加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
3、有效期:产品过期时间以盒子上的标签为准,建议首次实验后1个月内使用完毕所有组分。
操作关键步骤:
1、加样与孵育
使用校准移液器,加样时间控制在5分钟内,避免气泡和孔壁接触。
孵育温度和时间需严格遵循说明书(如37℃ 30分钟),避免温度波动。
2、洗涤与显色
洗涤液需现配现用,每孔注满后静置30秒,拍干时避免交叉污染。
显色剂需避光使用,终止反应后15分钟内完成读数。
常见问题与解决方案:
高OD值样本:需稀释后复测,计算时乘以稀释倍数。
批间差异:不同批次试剂不可混用,建议同一实验使用同一批号。
结论建议:
1、正确保存和使用小鼠ELISA试剂盒的关键在于:
2、严格按照说明书推荐的保存温度(2-8℃)保存试剂;
3、使用前确保所有试剂恢复至室温;
4、样本处理要规范,避免污染和反复冻融;
遵循以上指南,可以确保小鼠ELISA试剂盒的有效使用和保存,从而获得可靠的实验结果。