当NK细胞遇上肿瘤细胞，一场细胞级的“猫鼠游戏”正在上演。
在细胞治疗的舞台上，诱导多能干细胞来源的NK细胞（iPSC-NK）正逐渐成为攻克实体瘤与血液肿瘤的明星武器。在上一集的“备战篇”中，我们的客户已利用HVITA灌流培养系统，高效、稳定地制备出了高活性的iPSC-NK细胞。

本期，实验进入紧张刺激的“实战检验”阶段。为了在细胞治疗的“军备竞赛”中抢占先机，精准找到最强效靶比，客户引入了我们的“科研侦察卫星”——SPICA M1 活细胞实时成像系统。它将潜入细胞培养箱，48小时不间断地对两张不同的NK细胞“猎杀”肿瘤细胞的全过程进行现场直播，让研究者以第一视角，目睹这场微观世界的免疫攻防战。

01 实验方法
客户以SKOV（GFP）肿瘤细胞系为靶细胞，与不同亚型的NK细胞按效靶比1:1、1:2、1:3、1:4分别进行共培养，设置不含NK细胞的SKOV肿瘤细胞对照组，于96孔板中铺板，利用SPICA M1进行持续活细胞成像。

具体96孔板的铺板方案如下：
02  实验结果
1.时序增殖曲线分析：
无需数据处理，可以培养过程中直接呈现NK细胞的剂量依赖性杀伤效应。在无NK细胞或低效靶比条件下，荧光强度随着时间变化上升快，SKOV细胞（GFP）呈快速增殖趋势；随着NK细胞比例提高，SKOV细胞增殖明显受到抑制。

2.荧光面积动态变化：
对照组肿瘤细胞SKOV（GFP）荧光面积持续增加，表明细胞正常增殖；而共培养组荧光面积相较于对照组明显减少，证实NK细胞对肿瘤细胞SKOV（GFP）的有效杀伤。
3.SKOV和不同亚型NK在不同效靶比下，增殖变化：
由上图可知，NK 亚型1/ NK 亚型2对skov靶细胞杀伤效果十分明显。此外，当效靶比在1：4时，NK亚型2比 NK 亚型1表现出更强的杀伤效果。

4.延时视频展示细胞互作过程：
 
a. 对照组视频中，肿瘤细胞持续分裂、增殖，荧光信号增强；
b. 共培养组视频完整记录了NK细胞与肿瘤细胞接触、攻击直至肿瘤细胞死亡的动态过程；
c. 视频中还捕捉到肿瘤细胞在受到攻击时，可能通过增强细胞间黏附（如E-钙粘蛋白、整合素等），形成细胞团以抵御NK细胞杀伤的现象，为机制研究提供线索。

03  优势总结：

• 实时动态监测：在共培养环境下直接观察免疫细胞与肿瘤细胞的相互作用全过程，实现杀伤效果的连续、原位评估。
• 高通量自动化：支持多条件并行检测，可全天候自动运行，无需人工干预，大幅提升实验效率与数据产出速度。
• 无损原位成像：成像过程中培养板保持静止，不干扰细胞间相互作用，确保数据客观真实。
• 灵活兼容性强：标配Z轴层扫与大视野拼接功能，适用于2D细胞、3D肿瘤球及类器官等多种模型。
• 数据完整可靠：长达数周至数月的连续监测，完整覆盖实验全程，避免传统终端法（如流式检测）的时间点遗漏问题。

结论
Spica M1 活细胞实时成像系统以非侵入、高通量、全自动的方式，为NK细胞杀伤效能的评估提供了强大工具，不仅显著节省人力与时间成本，更通过全程动态记录，为优化细胞治疗工艺与深入机制研究提供了坚实的数据支撑。
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